Bcr-Abl WT和Bcr-Abl T315I抑制劑(GNF-7)

Bcr-Abl WT和Bcr-Abl T315I抑制劑(GNF-7)公司*的產品：Anti-CD303/BDCA-2/CLEC4C 熒光素標記C型凝集素結構域家族4成員C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-factor VIII/PE 熒光素PE標記第八因子相關抗原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
白細胞

產品屬性：

中文名稱：Bcr-Abl WT和Bcr-Abl T315I抑制劑(GNF-7)

英文名稱：GNF-7

產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

波斯坦沙門氏菌Delftia acidovorans

羊蹄甲長蠕孢Rhodococcus sp.

竹針孢座囊菌Rhodococcus sp.

耐熱芽孢芽孢桿菌Arthrobacter scleromae

圓酵毛殼Sphingobacterium sp.

矩圓黑盤孢Ruegeria atlantica

谷棒桿菌Sporosarcina psychrophila

污黑腐皮殼Sporosarcina globispora

海泥黃桿菌Rhodococcus erythropolis

白球擬酵母Erwinia carotovora

大腸埃希菌Acinetobacter calcoaceticus

炭疽芽胞桿菌Rhodococcus sp.

魚肉 揮發(fā)性鹽基氮Pseudonocardia kongjuensis

熱帶假絲酵母Planococcus antarcticus

栗疫菌Asticcacaulis biprosthecium

聚生殼菌Asticcacaulis biprosthecium

磷化神經突觸前膜胞內蛋白抗體黑脛病果膠桿菌腫痂鏈霉菌

磷化信號轉導和轉錄激活因子6抗體屎腸球菌 蘭氏D群指狀游動放線菌

磷化原基因蛋白18犬瘟熱病毒枝頂孢霉屬菌種

磷化核突觸蛋白α抗體Plantibacter flavus正青霉屬
Bcr-Abl WT和Bcr-Abl T315I抑制劑(GNF-7)SODD 英文名稱： Bcl2結合抗凋亡蛋白4抗體 0.2ml

ETL 英文名稱： EGF毒素受體7跨膜結構域蛋白1抗體 0.2ml

CD57抗體 Anti-CD57 0.1ml

Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GATA6(Tyr271) 磷酸化GATA結合蛋白6抗體 規(guī)格 0.1ml

ErbB-3/HER3(Epidermal growth factor receptor3) 表皮生長因子受體3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)