NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)

公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)
英文名

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)

英文名稱：L-Canavanine sulfate

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)ELISA Kit英文名稱：THBS1 ELISA Kit色CYP3A抗體包裝25g

血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA Kit英文名稱：TM ELISA Kit色cP450 CYP20A1抗體包裝5g

血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)ELISA Kit英文名稱：SAA2 ELISA Kit色cP4501B1抗體包裝1g

血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)ELISA Kit英文名稱：SAP ELISA Kit色cP450 CYP26A1抗體包裝5g

血紅氧合2(HO2)ELISA Kit英文名稱：HO2 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝100mg

血紅氧合1(HO1)ELISA Kit英文名稱：HO1 ELISA Kit磷化周期E2抗體包裝5g

血紅蛋白(HB)ELISA Kit英文名稱：HB ELISA Kit周期M3抗體包裝1g

血管抑(ANG)ELISA Kit英文名稱：ANG ELISA Kit周期Y/X抗體包裝250mg

血管性血友病因子(vWF)ELISA Kit英文名稱：vWF ELISA Kit磷化周期D3抗體包裝1g

血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)ELISA Kit英文名稱：VCAM1 ELISA Kit色b5還原3抗體包裝1g

血管生成樣蛋白7(ANGPTL7)ELISA Kit英文名稱：ANGPTL7 ELISA KitCWC22蛋白抗體包裝250mg

血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA Kit英文名稱：ANGPTL3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框95抗體包裝5g

血管生成樣蛋白2(ANGPTL2)ELISA Kit英文名稱：ANGPTL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框67抗體包裝10MG

血管生成樣蛋白1(ANGPTL1)ELISA Kit英文名稱：ANGPTL1 ELISA Kit磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體包裝100ml

血管生成4(ANGPT4)ELISA Kit英文名稱：ANGPT4 ELISA Kit原卟啉氧化3抗體包裝25ml

ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體泛交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)N/A
NO synthase抑制劑(L-Canavanine sulfate)四乙二乙烯

萜品油烯

溴乙烯

氧化環(huán)己烯

乙烯

乙氧乙烯

異丁乙烯

異杜烯

異戊乙烯