公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SK channel抑制劑(ICA)
英文名稱:ICA
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ICA(N-(pyridin-2-yl)-4-(pyridin-2-yl)thiazol-2-amine)是SK通道(SK channel)抑制劑。ICA有抗利什曼原蟲活性,IC50值為2.1μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:3374-88-7 別名:N-[4-(2-Pyridinyl)-2-thiazolyl]-2-pyridinamine 純度:99.63% 分子量:254.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Androstenedione(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin)1號染色體開放閱讀框41抗體包裝100ml
Argatroban(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Saracatinib(AZD0530)1號染色體開放閱讀框144抗體包裝500ml
Atipamezole HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Secnidazole4號染色體開放閱讀框3抗體包裝1g
Atomoxetine HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Secnidazole組織蛋白S抗體包裝1g
Atorvastatin calcium(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sequoyitol死亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝5g
Bambuterol HCl(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sermorelin Acetate前列腺雄激抑制信號蛋白1抗體包裝1g
Beclomethasone Dipropionate...英文名稱: Silver Sulfadiazine磷化心肌肌鈣蛋白抗體包裝5g
Betamethasone Valerate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Silver Sulfadiazine脊髓灰質(zhì)炎受體相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
Betamethasone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Simvastatin19號染色體開放閱讀框73抗體包裝100g
Bimatoprost(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Simvastatin整合αM抗體Integrin αM包裝500g
Bleomycin A5 Hydrochloride ...英文名稱: Combretastatin A4 disodium phosphate (CA4P)軸突蛋白4/少突膠質(zhì)抗體包裝100g
Bortezomib(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sisomicin Sulfate軸突相關(guān)CNTP2蛋白抗體(少突膠質(zhì))包裝25g
Budesonide(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sisomicin Sulfate酪蛋白激δ1抗體包裝5g
Candesartan cilexetil(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Somatostatin Acetate活化白粘附分子抗體包裝100g
Carbamazepine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Streptozocin1號染色體開放閱讀框191抗體包裝25g
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%血纖肽/纖維蛋白肽A試劑盒鹽小檗;BerbaMine dihy
: HBUM82521資源名稱: 金黑小單孢菌 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR血纖蛋白原γ鏈試劑盒新西蘭牡荊苷;Vicenin-2
木霉屬Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:效價測定血纖蛋白試劑盒纈草;Homobaldrinal
SK channel抑制劑(ICA)烯酰水合含結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Iron granules
腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體D-果糖(標(biāo)準(zhǔn)品) Iron(III) citrate
自身抗原EDC4抗體D-四氫藥根(標(biāo)準(zhǔn)品) DL-Lactic acid
E3泛蛋白連接EDD抗體D-松(標(biāo)準(zhǔn)品) DL-Lactic acid
胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體DL-薄荷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ammonium citrate, tribasic
轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體Euojaponine D CAS, Chrome azurol S
內(nèi)皮脂肪抗體Eupeasaponin I Cytidine-5'-triphosphate (CTP), disodium salt
MYC啟動子結(jié)合蛋白1抗體Hederacolchiside A1(標(biāo)準(zhǔn)品) Cellulase
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白29抗體Hederacolchiside E Pyronin Y