產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Ack1抑制劑(AIM-100)
英文名稱:AIM-100
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
AIM-100是Ack1抑制劑,IC50為24nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:873305-35-2 純度:99.98% 分子量:371.43 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
蘇云金芽孢桿菌考馬斯亮藍快速染色液Escherichia coli小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)
新疆鹽紅菌抗原熱修復(fù)試劑(100×濃縮液)Escherichia coli小鼠維生B6(VB6)
陰溝腸桿菌檸檬鹽緩沖液(抗原熱修復(fù)試劑)(0.01M pH6.0)Escherichia coli小鼠維生B6(VB6)
釀酒酵母檸檬鹽緩沖液 (1M pH6.0)Escherichia coli小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
黃紅菇二基聯(lián)/DAB染色試劑盒(25×)Escherichia coli小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)
沙漠奇異球菌DAPI染色液(核染色液)Escherichia coli小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
柱彎孢蘇木-伊紅染色試劑盒Escherichia coli小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)
金針菇辣根過氧化物(辣根)Escherichia coli小鼠可溶性P選擇(sP-selectin)
熱帶假絲酵母抗體稀釋液Escherichia coli小鼠可溶性P選擇(sP-selectin)
鼠李糖乳桿菌中性樹膠封片劑Escherichia coli小鼠S100蛋白(S-100)
維羅納假單胞菌麗春紅染色液Escherichia coli小鼠S100蛋白(S-100)
米蘭鏈霉菌紅裂解液Escherichia coli小鼠白介1(IL-1)
空腸彎曲桿菌SDS-PAGE凝膠制備試劑盒Escherichia coli小鼠白介1(IL-1)
蒼黃擬無枝菌多聚賴防脫磨砂玻片(防脫片載玻片)Escherichia coli小鼠白介1β (IL-1β)
解脂亞羅酵母上樣緩沖液-還原型(5×)Escherichia coli小鼠白介1β (IL-1β)
殼菌SDS-PAGE 蛋白上樣緩沖液-還原型Escherichia coli小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)
核受體相關(guān)因子-1抗體新月彎孢表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞
伴肌動蛋白抗體螺卷毛殼表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞
核呼吸因子-1抗體齊整小核菌人紅系白血病細胞
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白22A17抗體煙色曲霉人干細胞因子單克抗體細胞株
Ack1抑制劑(AIM-100)綠白鏈孢囊還原亞種 對羥基丁酯
釀酒酵母 對羥基酯
魯氏毛霉 對羥基
白僵 維生K3
膠孢 茶皂
大腸埃希氏 棕櫚酸甲酯
鲇愛德華氏 異香蘭酸
蔗糖
伸長鹽單胞* 吳茱萸總堿
石榴干腐 水蘇糖
大腸埃希 阿波糖
球孢白僵 L-半胱
柳府皮殼 維生A
*蜜環(huán) 羊藿次苷I
就地堆肥地芽孢桿 鹽酸野靛堿
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)