公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC、EGFR和HER2抑制劑(CUDC-101)
英文名稱:CUDC-101
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CUDC-101是一種高效的HDAC、EGFR和HER2抑制劑,對應(yīng)的IC50值分別為4.4、2.4和15.7nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1012054-59-9 純度:99.59% 分子量:434.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
粉紅單端孢霉艾柯病 IgM(間接法二步法)Anti-MAVS Antibody人兒茶(CA)
大腸埃希氏菌輪狀病 IgG(間接法二步法)Anti-MAZ Antibody人兒茶(CA)
膜醭畢赤酵母輪狀病 IgM(間接法二步法)Anti-MBTPS1 Antibody人半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
嗜鹽沉積物桿菌腺病 IgG Ⅲ型(間接法二步法)Anti-MBD1 Antibody人半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)
雷氏普羅威登斯菌腺病 IgM Ⅲ型(間接法二步法)Anti-MBD3 Antibody人乙酰受體抗體(AChRab)
鑲邊鏈霉菌腺病 IgG Ⅶ型(間接法二步法)Anti-MBL2 Antibody人乙酰受體抗體(AChRab)
灰橙鏈霉菌腺病 IgM Ⅶ型(間接法二步法)Anti-MBTPS2 Antibody人5羥色(5-HT)
樟疫霉腺病 IgM Ⅺ型(間接法二步法)Anti-MBTPS2 Antibody人5羥色(5-HT)
球色單隔孢屬大鼠褪黑Anti-MC5R Antibody人抑制A(INH-A)
銅綠假單胞菌兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白Anti-MC1R Antibody人抑制A(INH-A)
黑曲霉小鼠癌胚抗原Anti-MCHR2 Antibody人性激結(jié)合球蛋白(SHBG)
灰黃鏈霉菌蘇州亞種人ω干擾Anti-MCM3AP Antibody人性激結(jié)合球蛋白(SHBG)
楚氏喜鹽芽孢桿菌腺病 IgG Ⅺ型(間接法二步法)Anti-MCPH1 Antibody人脫氫表雄S7(DHEA-S7)
聚貪噬菌魚類白介1αAnti-MCPH1 Antibody人脫氫表雄S7(DHEA-S7)
裂孔平伏菌腺病 IgG 混合型(間接法二步法)Anti-MDM1 Antibody人脫氫表雄(DHEA)
粘膜鞘單胞菌腺病 IgM 混合型(間接法二步法)Anti-MDFI Antibody人脫氫表雄(DHEA)
肌相關(guān)蛋白1抗體球孢鏈霉菌人源胰腺癌細(xì)胞
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體青色鏈霉菌人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞亞系
RAS癌基因家族蛋白RAB40C抗體紅霉鏈霉菌人肺腺癌放后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移細(xì)胞
類風(fēng)濕因子抗體滅蚊鏈霉菌瘤牛皮膚細(xì)胞
HDAC、EGFR和HER2抑制劑(CUDC-101)綠色木霉 9-Methoxy-α-lapachone
晶蘑屬 9-Hydroxy-alpha-lapachone
纖維單胞屬 9,9'-Di-O-(E)-feruloylsecoisolar
3C9-D11-H11 8-Demethylsideroxylin
紫穗霉 8-Acetoxypentadeca-1,9Z-diene-4,
紫紅曲霉(可訂購) 7-羥基豨薟精
釀酒酵母 7-Hydroxy-3-prenylcoumarin
短波單胞屬 白桑八
(疣孢漆斑) 仙鶴草內(nèi)酯
橙鱗傘7 Agatharesinol
竹喙球 乙?;惏叵┧?/span>
猴頭 Acetylepipodophyllotoxin
栗酒裂殖酵母 7-Hydroxy-2',5,8-trimethoxyflava
貝倫格葡萄座腔梨生專化型 7,4'-Di-O-methylapigenin 5-O-glu
大腸埃希 6-羥基豆甾-4-烯-3-酮