LIMK2抑制劑(T56-LIMKi)

LIMK2抑制劑(T56-LIMKi)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化P63抑制基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/Biotin 生物素化兔抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
細(xì)胞表面趨化因子

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

地衣芽孢桿菌Candida krusei

喜鹽裸囊菌Candida rugopelliculosa

珞珈山鏈霉菌Candida parapsilosis

黑木耳Kluyveromyces yarrowii

梅林青霉Kluyveromyces thermotolerans

長根小奧德蘑Pichia farinosa

華根霉Saccharomyces cerevisiae

核果黑腐皮殼菌Rhodotorula rubra

不解糖鞘單胞菌Saccharomyces cerevisiae

阿達(dá)青霉Saccharomyces cerevisiae

大腸埃希氏菌Candida boidinii

孟氏假單胞菌Candida boidinii

脫硫脫硫弧菌脫硫亞種*Issatchenkia orientalis

微紫青霉Pichia pastoris

蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)Candida insectamans

膜醭假絲酵母Candida pseudolambica

小鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒含酰tRNA合成結(jié)構(gòu)域1抗體人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)麥冬內(nèi)酯A

小鼠降鈣(CT)免疫試劑盒粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)麥冬皂苷A

小鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒爾曼綜合癥基因1抗體人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab) 麥冬皂苷B

小鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAG Ab) 麥冬皂苷C
LIMK2抑制劑(T56-LIMKi)Serum amyloid A 4 protein 英文名稱： 血清淀粉樣蛋白4抗體 0.2ml

EphB1+EphB2+EphB3+EphB4 英文名稱： 酪酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體 0.2ml

酪氨酸激酶B抗體 Anti-Trk B 0.1ml

Anti-Transthyretin /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IRS1(Ser312) 磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格 0.1ml

SARS putative orflab polyprotein (SARS coronavirus CUHK-W1)(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg