公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ERRβ/γ激動(dòng)劑(GSK-4716)
英文名稱:GSK-4716
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
GSK-4716是一種選擇性ERRβ/γ激動(dòng)劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):101574-65-6 分子量:282.34 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
血管生成2(ANGPT2)ELISA Kit英文名稱:ANGPT2 ELISA Kit間隙連接蛋白43抗體包裝25g
血管生成1(ANGPT1)ELISA Kit英文名稱:ANGPT1 ELISA Kit緊密連接蛋白25抗體包裝5g
血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)ELISA Kit英文名稱:PROCR ELISA Kit中心體蛋白78抗體包裝1g
血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA Kit英文名稱:VEGFR3 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框146抗體包裝25g
血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR2)ELISA Kit英文名稱:VEGFR2 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框154抗體包裝5g
血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)ELISA Kit英文名稱:VEGFR1 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框16抗體包裝1g
血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)ELISA Kit英文名稱:VEGFD ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框78抗體包裝5g
血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)ELISA Kit英文名稱:VEGFC ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框79抗體包裝25g
血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)ELISA Kit英文名稱:VEGFB ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框84抗體包裝5g
血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFA)ELISA Kit英文名稱:VEGFA ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框85抗體包裝25g
血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(CDH5)ELISA Kit英文名稱:CDH5 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框91抗體包裝5g
血管緊張Ⅱ(ANGⅡ)ELISA Kit英文名稱:ANGⅡ ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框93抗體包裝100g
血管緊張Ⅰ(AngⅠ)ELISA Kit英文名稱:AngⅠ ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框96抗體包裝500g
血管非炎性蛋白3(VNN3)ELISA Kit英文名稱:VNN3 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框98抗體包裝1g
序列相似家族3成員B(FAM3B)ELISA Kit英文名稱:FAM3B ELISA Kit分裂周期蛋白5樣蛋白抗體包裝5g
ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗體泛交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)N/A
ERRβ/γ激動(dòng)劑(GSK-4716)菘藍(lán)-β-肟
衣托肟
乙酰二肟
4-氧化芐
對三氟芐
對溴代溴化芐
間三氟芐
鄰三氟芐
硫芐