細(xì)胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)

細(xì)胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)公司*的產(chǎn)品：Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC 熒光標(biāo)記防御β2抗體IgG粒徑0.49 - 0.69 mm
Defensin Beta1/FITC 熒光標(biāo)記防御β1抗體IgG粒徑:0.500 - 0.750 mm
Defensin Beta2/beta-defensin

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：細(xì)胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)

英文名稱：MMAF Hydrochloride

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS19EB 病 IgG(間接法二步法)Anti-MDM2 Antibody人降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)

孟氏假單胞菌EB 病 IgM(間接法二步法)Anti-MDM4 Antibody人降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)

Leucobacter kyeonggiensis肺炎支原體 IgG(間接法二步法)Anti-MECP2 Antibody人生長(zhǎng)抑(SS)

Nocardioides simplex肺炎支原體 IgM(間接法二步法)Anti-ME1 Antibody人生長(zhǎng)抑(SS)

球孢枝孢流感病A IgG(間接法二步法) Anti-ME3 Antibody人生長(zhǎng)激釋放多肽(GHRP)

平菇流感病A IgM(間接法二步法)Anti-MED1 Antibody人生長(zhǎng)激釋放多肽(GHRP)

萎蔫短小桿菌付流感病 IgG(間接法二步法)Anti-MED13L Antibody人抑制B(INH-B)

蓋替隱球酵母付流感病 IgM(間接法二步法)Anti-MED14 Antibody人抑制B(INH-B)

空泡單胞菌流行性出血熱病 IgG(間接法二步法)Anti-MED13 Antibody人促甲狀腺釋放激(TRH)

環(huán)形凸臍蠕孢流行性出血熱病 IgM(間接法二步法)Anti-MECP2 Antibody人促甲狀腺釋放激(TRH)

枯草芽孢桿菌流行性腮腺炎病 IgG(間接法二步法)Anti-MED18 Antibody人雌激(E)

葡萄座腔菌流行性腮腺炎病 IgM(間接法二步法)Anti-MED21 Antibody人雌激(E)

無(wú)二檸檬桿菌乙型腦炎病 IgG(間接法二步法)Anti-MED24 Antibody人褪黑(MT)

傳染性支氣管炎病乙型腦炎病 IgM(間接法二步法)Anti-MED23 Antibody人褪黑(MT)

不動(dòng)桿菌人絨毛膜促性腺激(夾心法一/二步法)Anti-MED23 Antibody人6前列腺(6-K-PG)

玫瑰考克氏菌魚類白介1βAnti-MEF2B Antibody人6前列腺(6-K-PG)

Rab蛋白GTP激活蛋白1抗體燼灰鏈霉菌人伯基特淋巴瘤細(xì)胞

c-Myc應(yīng)答蛋白抗體產(chǎn)色鏈霉菌人胎盤絨膜癌細(xì)胞

環(huán)指蛋白157抗體白色鏈霉菌人涎腺癌細(xì)胞

G蛋白相關(guān)RABX5抗體大團(tuán)囊蟲草615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株
細(xì)胞分裂抑制劑(MMAF Hydrochloride)黑色附球 6β-Hydroxyipolamiide

假單胞屬 6-O-p-Hydroxybenzoylaucubin

熒光假單胞 6-甲氧基柚皮

赭色擲孢酵母 6a-Hydroxymaackiain

放射桿狀根瘤 6-Acetonyldihydrosanguinarine

英諾克李斯特氏 6-Acetonyldihydrochelerythrine

豇豆慢生根瘤 6,8-二異戊烯基金雀異黃

串珠鐮孢 5-O-Methylnaringenin

樹舌靈芝(平蓋靈芝) 5-O-Methylhierochin D

尖頂絲膜 5-羥基-7-乙酰氧基黃酮

產(chǎn)氣莢膜梭       C型 5-Dehydroxyparatocarpin K

中華散尾鬼筆 5-乙酰氧基-7-羥基黃酮

阪崎腸桿 5,7-Dihydroxy-6,8-dimethoxyflavo

釀酒酵母 5,7-二乙酰氧基黃酮

枯草芽孢桿 5,7-Diacetoxy-8-methoxyflavone