GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）

GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）公司*的產品：Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 熒光標記整合αV抗體IgG硫氫 AR
Integrin AlphaV /FITC 熒光標記巨噬來源的趨化因子αV抗體IgG 高鋇 水合物 AR,99%
Integrin- Beta3/ITG- Beta3/CD61/FITC 熒光標記整合-β3抗體Ig

產品屬性：

中文名稱：GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）

英文名稱：Indirubin-3-monoxime

產品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Lonsdalea quercina subsp. quercina人抗甲狀腺微粒體抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)

德曼鏈霉菌小鼠25羥基維生D3Anti-SLC4A1AP Antibody人活化Ⅻ(FⅫa)

康寧木霉大鼠白介3Anti-SLC39A9 Antibody人活化Ⅻ(FⅫa)

橄欖色青霉大鼠白介5Anti-SLC52A1 Antibody人游離蛋白S(FP-S)

巴氏醋桿菌人抗甲狀腺球蛋白抗體Anti-SLC4A1AP Antibody人游離蛋白S(FP-S)

盤孢屬小鼠Ⅲ型前膠原肽Anti-SLC52A1 Antibody人異常凝血原(APT)

香菇小鼠維生CAnti-SLC52A2 Antibody人異常凝血原(APT)

泡盛曲霉人谷脫羧自身抗體Anti-SLC52A2 Antibody人循環(huán)免疫復合物(CIC)

無花果擬盤多毛孢大鼠苗條受體Anti-SLC5A2 Antibody人循環(huán)免疫復合物(CIC)

巴氏醋桿菌巴氏亞種人抗血小板抗體IgG/M/AAnti-SLC5A3 Antibody人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)

螢光假單胞桿菌小鼠Ⅱ型膠原Anti-SLC6A15 Antibody人血小板相關抗體IgM(PA-IgM)

嗜鹽鹽水球形菌大鼠瘦Anti-SLC6A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)

光亮小紅孔菌人抗淋巴球蛋白Anti-SLC5A6 Antibody人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)

球孢枝孢大鼠白血病抑制因子Anti-SLC6A16 Antibody人纖溶原(Plg)

死亡谷放線多孢菌小鼠維生B6Anti-SLC6A17 Antibody人纖溶原(Plg)

田頭菇大鼠L選擇Anti-SLC8A1 Antibody人性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)

環(huán)指蛋白92抗體核盤菌M08#15

環(huán)指蛋白調節(jié)蛋白激C蛋白抗體雙色蠟蘑（不提供）M12#10

TRIM50蛋白抗體辣椒疫霉菌15A7

環(huán)指蛋白88抗體大馬勃菌LW-5F3
GSK-3β抑制劑（Indirubin-3-monoxime）棱柱散尾中華變型 乙酰丁香酮

解烴棒桿 DL-異亮

變異庫克 巖藻黃質

細鏈格孢 新魯斯可皂苷元

釀酒酵母 L-異亮

灰紅鏈霉 新苦味

中慢生華癸根瘤 香紫蘇二

阪崎腸桿 西門木炔酸乙酯

麻孢毛殼 西門木炔酸

枯草芽孢桿 維司那定

假單胞 水蘇堿

牛肝屬 十七碳酸甲酯

小鱒魚大洋芽孢桿英考丹納亞種 氫樟柳堿

百色腐霉 氫加蘭他敏

類干酪乳桿 青陽參苷元 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)