RhoA/C介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄抑制劑(CCG-1423)

RhoA/C介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄抑制劑(CCG-1423)公司*的產(chǎn)品：PKB/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B抗體IgG
PKB/AKT-1 /FITC 熒光標(biāo)記蛋白激B抗體IgG
P-AKT1/PKB1/2/3(pSer473) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白激B(pSer473)抗體IgG
phospho-Akt(Thr450) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化蛋白激B抗體（蘇氨化位點(diǎn)：4

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：RhoA/C介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄抑制劑(CCG-1423)

英文名稱：CCG-1423

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

炭疽芽孢桿菌四甲基聯(lián)顯色試劑盒(即用型工作液)Escherichia coli小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)

條紋炭角菌Tris-甘蛋白電泳緩沖液(粉劑)Escherichia coli小鼠血栓B2(TXB2)

大腸桿菌吐溫20Escherichia coli小鼠血栓B2(TXB2)

宛氏擬青霉WIP組織裂解液Escherichia coli小鼠乙酰(ACH)

根瘤菌WB一抗稀釋液Escherichia coli小鼠乙酰(ACH)

殺鮭氣單胞菌日本鮭亞種WB二抗稀釋液Escherichia coli小鼠白三烯B4(LTB4)

緋紅密孔（不到這個種）WB洗滌液Escherichia coli小鼠白三烯B4(LTB4)

大腸埃希氏桿菌WB封閉液Escherichia coli小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)

釀酒酵母電轉(zhuǎn)移緩沖液（Western轉(zhuǎn)膜液 粉劑）Escherichia coli小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)

枯草芽孢桿菌抗熒光淬滅劑Escherichia coli小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)

長枝木霉兔IgG親和層析柱Escherichia coli小鼠L選擇(L-Selectin/CD62L)

米氏假單胞菌小鼠IgG親和層析柱Escherichia coli小鼠尿氮(BUN)聯(lián)免疫試劑盒

小孢根霉原變種重組蛋白A親和層析柱Escherichia coli小鼠尿氮(BUN)聯(lián)免疫試劑盒

紅色紅曲霉GST融合蛋白親和層析柱Escherichia coli小鼠基轉(zhuǎn)移(ALT)聯(lián)免疫試劑盒

食砜節(jié)桿菌His鎳柱(His蛋白純化介質(zhì)填料)Escherichia coli小鼠基轉(zhuǎn)移(ALT)聯(lián)免疫試劑盒

高盧蜜環(huán)菌重組蛋白G親和層析柱Escherichia coli小鼠Toll樣受體4（TLR4）ELLSA

神經(jīng)肽Y1受體抗體暗孢節(jié)菱孢兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞

谷受體1抗體直立枝孢長尾綠猴腎細(xì)胞

神經(jīng)元抑制蛋白抗體蘋果黑腐皮殼袋鼠腎細(xì)胞

核因子κB抑制蛋白α抗體壞損假尾孢負(fù)鼠腎細(xì)胞
RhoA/C介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄抑制劑(CCG-1423)球孢白僵 楊芽黃

總狀毛霉原變型 鴉膽子D

黃隱球酵母 藥根堿

釀酒酵母 香草酸

豬瘟陰、陽性血清國家參考品 香葉木

喜堿兩面神 蒜

產(chǎn)氨棒桿 Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)

瓜笄霉 三蔗糖

百日咳鮑特（可訂) 胰蛋白胨大豆肉湯

米曲霉 雙

弗氏弧 乳糖肉湯

詹森青霉 茜

鏈霉 β-蒎烯

檸條根瘤 SIM培養(yǎng)基

陰溝腸桿 α-蒎烯