Rapamycin 自噬誘導劑，mTOR抑制劑

Rapamycin 自噬誘導劑，mTOR抑制劑公司*的產(chǎn)品：Snake poison Protein/FITC 熒光標記抗蛇蛋白抗體（蝮蛇）IgGN-叔丁氧羰-N'-(2-芐氧羰)-L-鳥氨 98%
Snake poison Protein/FITC 熒光標記抗蛇蛋白抗體（中華眼鏡蛇）IgGBOC-L-絲氨酯 BR
SNAP-25 /FITC 熒光標記突觸相關蛋白25抗體IgG

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Rapamycin 自噬誘導劑，mTOR抑制劑

英文名稱：Rapamycin(Sirolimus)

產(chǎn)品規(guī)格：1mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

炭疽芽胞桿菌20號染色體開放閱讀框7抗體Human AlaRS ELISA Kit人整合α2(ITGA2)免疫試劑盒

解淀粉芽孢桿菌20號染色體開放閱讀框79抗體Human ADAMDEC1 ELISA Kit人整合A5(ITGA5)免疫試劑盒

羊肚菌（不能訂購）20號染色體開放閱讀框94抗體Human ADH1C ELISA Kit人真胰島(TI)免疫試劑盒

釀酒酵母21號染色體開放閱讀框37抗體Human ACTL6A ELISA Kit人真核延伸因子2(eEF2)免疫試劑盒

清酒乳桿菌清酒亞種22號染色體開放閱讀框15抗體Human ADH4 ELISA Kit人真核起始因子4A - II(EIF4A2/DDX2B/EIF4F)免疫試劑盒

鏈格孢屬22號染色體開放閱讀框13抗體Human ADH6 ELISA Kit人張力蛋白4(TNS4)免疫試劑盒

糞生糞殼22號染色體開放閱讀框26抗體Human ADHFE1 ELISA Kit人粘蛋白3(MUC3)免疫試劑盒

球毛殼菌補體C2b鏈多肽抗體Human ACOXL ELISA Kit人粘蛋白2(MUC2)免疫試劑盒

深褐芽孢桿菌2號染色體開放閱讀框16抗體Human ADI1 ELISA Kit人增殖誘導配體(APRIL)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌2號染色體開放閱讀框27抗體Human ACP1 ELISA Kit人早期生長反應因子1(EGR1)免疫試劑盒

Bacteroides sartorii 磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human ADNP ELISA Kit人早期前列腺癌抗原2(EPCA2)免疫試劑盒

假單胞菌磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human ACSM2A ELISA Kit人早期活化抗原CD69(CD69)免疫試劑盒

豬鏈球菌分型血清參考品 血清型 SS5磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human AF-6 ELISA Kit人早老2(PS-2)免疫試劑盒

假單胞菌屬磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human ACSM3 ELISA Kit人早老1(PS-1)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human AF9 ELISA Kit人再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白(REG1A)免疫試劑盒

蠟樣芽孢桿菌磷化δ連環(huán)蛋白抗體Human ACSM5 ELISA Kit人載脂蛋白L1(APOL1)免疫試劑盒

黃傘Pholiota│adiposa (Fr.) Quel. 質(zhì)量規(guī)格：BRMAP磷雙特異性磷1試劑盒

核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum (Lib.) de Bary 質(zhì)量規(guī)格：>99%，BRL選擇試劑盒基丁香酚

黑脈羊肚菌Morchella│angusticeps 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-腎上腺巨豆三烯
Rapamycin 自噬誘導劑，mTOR抑制劑釀酒酵母 對羧基苯肼乳酸脫氫Elisa

黃曲霉 4-甲酰溴乳鐵蛋白Elisa

奇雄腐霉 5-硝基間苯二甲酸軟骨寡聚基質(zhì)蛋白Elisa

奧氏蜜環(huán) 5-羥基間苯二甲酸狀腺原氨酸Elisa

地衣芽孢桿 順式-4-羥基-L-脯氨酸三磷酸腺苷Elisa

云芝栓孔 (變色栓) 2-甲硫基-5-嘧啶-4-甲酸三葉因子3Elisa

多汁乳菇 Fluvoxamine maleate色氨酸羥化Elisa

Tardiphaga 2-?；掀ぱ苌蜃覧lisa

溶淀粉類芽孢桿 4-羥基-3-甲酸性;通透性增加蛋白Elisa

彎孢 3-噻吩酸神經(jīng)靶標酯Elisa

產(chǎn)紫青霉 2-TRIFLUOROMETHYLPYRAZINE神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白Elisa

球孢白僵 1,3-二氨基-2-神經(jīng)鞘氨磷酸Elisa

Brenneria salicis 1-(2-二甲基氨基乙基)-1H-5-巰基-四氮唑(MTZ)神經(jīng)生長因子Elisa

黃白馬杜拉放線 乙酸錳,四水神經(jīng)絲蛋白200Elisa

黑青霉 土霉神經(jīng)損傷誘導蛋白1Elisa