Hoechst33258/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒

Hoechst33258/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：TGF-beta 2 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β2抗體二氟溴酯 97%
TGF beta 3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3抗體氫加蘭他敏 98%
TGF Beta R1/TGFBR1 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體1抗體二氫黃酮甙 97%
TGF beta R2/TGFBR2 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體半胱鹽鹽 98%
TGF Beta R3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
牛蒡苷元(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱：  Picloram促性腺釋放激受體2抗體包裝25g

牛蒡子（牛蒡子）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PyrimethanilG蛋白偶聯(lián)受體106抗體包裝5g

牛蒡子苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PhenmediphamG0/G1期開(kāi)關(guān)調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝100g

牛蒡子苷元-4'-O-β-龍膽二糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Metalaxyl solutionG蛋白偶聯(lián)受體GPR162蛋白抗體包裝25g

牛大力(美麗崖豆藤）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nitrapyrin鋅指蛋白461抗體包裝1g

牛膽粉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ProfenofosG蛋白偶聯(lián)受體109A抗體包裝5g

牛耳楓（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PyriproxifenG激錨定蛋白1抗體包裝1g

牛黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Phenthoate solutionDNA修復(fù)蛋白GIYD2抗體包裝5g

?；蛆Z去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Propanil solution生長(zhǎng)抑制和分化相關(guān)蛋白抗體包裝25g

牛膝（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Phosalone生發(fā)中心相關(guān)核蛋白MCM3抗體包裝5g

牛至（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Propargite solution葡萄糖-6磷脫氫抗體包裝25g

扭肚藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Plifenat solution眼發(fā)育相關(guān)基因蛋白ODAG抗體包裝5g

女貞苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Plifenat solution特異性囊腫病液體蛋白15包裝1g

女貞子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Propamocarb特異性囊腫病液體蛋白15包裝250mg

諾米林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cloquintocet-mexyl生長(zhǎng)激釋放因子受體抗體包裝5g

施氏假單胞菌Pseudomonas│stutzeri 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品泡狀過(guò)表達(dá)癌癥促生存蛋白1試劑盒木香烴內(nèi)酯;costunolide

金針菇雜19Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于培養(yǎng),一合物排序連接蛋白3試劑盒毛蕊異黃;Calycosin

緊密枝頂孢Acremonium│strictum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品偶聯(lián)因子6試劑盒毛蕊異黃苷;Calycosin-7-O
Hoechst33258/PI細(xì)胞凋亡染色試劑盒葡萄座腔 苯甲酰肟消退Elisa

球孢白僵 反-4-氨基環(huán)己甲酸甲酯鹽酸鹽CD31分子Elisa

副豬嗜血桿 1-丁基-2,3-二甲基咪唑氯鹽CD105分子Elisa

苔蘚隱球酵母 4-(氨基磺酰基)苯酸碳酸酐6抗體Elisa

米曲霉疏展變種 7-硝基喹啉消退D1Elisa

冷桿屬 (S)-(+)-1-基茚滿,ChiPros,ee99+%富含脯氨酸的蛋白質(zhì)14Elisa

猴頭菇 3-氨基-2-羥基-5-溴吡啶線粒體融合2Elisa

忍冬黑痣 線粒體融合1Elisa

腐皮殼 (2S,3S)-1,2-環(huán)氧-3-(叔丁氧基羰基氨基)-4-苯丁烷Fission 1蛋白Elisa

酸桿屬 9,10-二氫蒽水痘帶狀皰疹病Elisa

墳?zāi)构?jié)桿 2-異丁基-4-甲基噻唑流行性腮腺炎病Elisa

動(dòng)物雙歧桿乳亞種 2-氨基蒽半胱氨酸豐富分泌蛋白3Elisa

核盤(pán) 苯肼-4-磺酸半水合物前列腺4Elisa

鴨疫里氏桿 乙酰乙酸對(duì)硝基芐酯骨髓基質(zhì)抗原1Elisa

假單胞屬 2-芐氧基-5-氯苯酸L-色酸Elisa