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鈣黃綠素AM

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更新時間:2022-04-21 15:23:32瀏覽次數(shù):357

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg
貨號 GOY-01X9823 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Calcein,AM
鈣黃綠素AM公司*的產(chǎn)品:PPARGC1A/PGC-1 Alpha 過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體對壬酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,異構(gòu)體混合物
PGRN 顆粒蛋白前體抗體對壬酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,純品
Prohibitin 抑制/腫瘤抑制因子抗體正 AR,97%
PI3K 脂酰肌激抗體正 CP,95%
PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) 化脂酰肌激抗體正 Sta

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:鈣黃綠素AM

英文名稱:Calcein,AM

產(chǎn)品規(guī)格:10μg

發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹:

鈣黃綠素AM,是一種應(yīng)用廣泛的綠色熒光細(xì)胞標(biāo)記物。鈣黃綠素AM具有膜透性,共孵育時可以傳過細(xì)胞,其本身不具有熒光信號,但在胞內(nèi)被酯酶水解后,生成具有熒光信號的鈣黃綠素。

在健康的活細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中,鈣黃綠素可以保持高負(fù)電荷狀態(tài)。由于其對細(xì)胞的毒性小,鈣黃綠素AM 已經(jīng)被廣泛用于研究細(xì)胞膜的完整性和長期示蹤觀察以及活細(xì)胞計數(shù)。

CAS:148504-34-1

分子式:C46H46N2O23

分子量:994.86

儲存:-20℃,避光,有效期12個月

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

車前草苷D英文名稱: 1-Naphthalene ethanol核仁纖維蛋白抗體包裝1g

車前子(車前)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Naphthyl acetate鐵蛋白輕鏈抗體包裝250mg

車葉草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Octacosanol肝核因子3抗體包裝5g

沉香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol果糖1,6-二磷酯抗體包裝100g

沉香四英文名稱: 2,2-Dimethyl-1,3-propanediol6磷果糖激抗體包裝1g

陳皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,2-Dimethylsuccinic acid肌肉果糖二磷抗體包裝5g

陳皮炭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,7-Dihydroxynaphthalene纖維蛋白原γ鏈抗體包裝5g

橙黃決明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2,6-Dichloroquinone-4-chlorimide纖維蛋白肽B抗體(血纖肽B)包裝100ml

橙皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Adamantanol原癌基因c FGR抗體包裝100ml

橙皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Adamantanone肢體畸形相關(guān)蛋白FHOD1抗體包裝500ml

橙皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Bromonaphthalene磷化肢體畸形相關(guān)蛋白FHOD1抗體包裝100g

匙羹藤苷元英文名稱: 2-Chloroacetamide纖連蛋白2抗體包裝25g

匙羹藤新苷元英文名稱: 2-Chloroethanesulfonic acid sodium salt纖連蛋白7抗體包裝5g

匙羹藤葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2'-Deoxyinosine-5'-monophosphate sodium salt彈性蛋白結(jié)合蛋白Fcn2抗體包裝10MG

匙羹藤皂苷C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Ethoxybenzaldehyde范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1抗體包裝1g

巴氏醋桿菌Acetobacter│pasteurianus 質(zhì)量規(guī)格:純度≥99.0%,含量≥98.5%生長分化因子15試劑盒七葉膽苷IX;

惡臭假單胞菌Pseudomonas│putida 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子試劑盒去檳榔次堿;Guvacine hydr

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥99%腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物試劑盒青蒿乙;Arteannuin
鈣黃綠素AMChromohalobacter 顏料黃1KL-7Elisa

宓花豆根瘤 2-氯-5-溴甲酯抗M3D受體抗體Elisa

塔賓曲霉 4-甲基-5-甲酸基-1,3-惡唑熱休克蛋白27Elisa

傘枝犁頭霉 鹽酸安他唑啉酪氨酸激Elisa

柱形矛束霉 7-羥基-5-甲基-1,3,4-三氮利磷酸化HER2蛋白Elisa

水生拉恩氏 2-溴-5-氯-1,3-二氟苯膜聯(lián)蛋白ⅡIgG抗體Elisa

糞產(chǎn)堿桿 3-氯-5-氟膜聯(lián)蛋白ⅡIgM抗體Elisa

科氏芽孢桿(可訂購) 對氯苯乙酰氯Mac-2結(jié)合蛋白糖基化異構(gòu)體Elisa

樟疫霉 蘆丁三水合物白喉抗體Elisa

鏈格孢 烯酸己酯載脂運載蛋白-2Elisa

冬蟲夏草(冬蟲夏草,蝙蝠蛾被毛孢,中國被毛孢) 4-氨基苯甲脒過氧化物1Elisa

三葉草根瘤 5-溴-2-氟腺病7型IgG抗體Elisa

棘孢小單孢 (E)-乙酸-2-己烯酯腺病7型IgM抗體Elisa

楊生盤二孢 3-溴-4-T白血病1+2型病Elisa

地衣芽孢桿 3-溴-4-甲酯ATP合成Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

 


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