公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:胚胎外胚層發(fā)育(EED)抑制劑(EED226)
英文名稱:EED226
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
EED226是高效選擇性的胚胎外胚層發(fā)育(EED)抑制劑,IC50值為22nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):2083627-02-3 純度:98.70% 分子量:369.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
南方靈芝白介-7受體a抗原Anti-CSF2RA Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)
ATCC 9763生長(zhǎng)抑制因子基因1抗原Anti-CSF2RB Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)
*安絡(luò)小皮傘菌、鬼毛針、黑柄皮傘菌抑制α抗原Anti-CSH1 Antibody人腫瘤壞死因子β(TNF-β)
枯斑擬盤多毛孢抑制beta A抗原Anti-CSNK1G1 Antibody人腫瘤壞死因子β(TNF-β)
球孢白僵菌抑制βB抗原Anti-CSNK1G2 Antibody人腫瘤壞死因子α(TNF-α)
大腸埃希菌整合α3抗原Anti-CSGALNACT1 Antibody人腫瘤壞死因子α(TNF-α)
*味牛肝菌整合β5抗原Anti-CSNK1G2 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)
地生鱗傘整合α1抗原Anti-CSRNP2 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)
草色串孢整合α4β7抗原Anti-CSNK2A1 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)
檸檬色節(jié)桿菌整合αE2抗原Anti-CSRP1 Antibody人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)
pYes2/CTENPP3抗原Anti-CSRL1 Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)
小青霉支架蛋白抗原Anti-CSRNP3 Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)
臭曲霉?jié)兎N干擾調(diào)節(jié)因子抗原Anti-CST11 Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)
葡萄座腔菌白介-1受體相關(guān)激2Anti-CST3 Antibody人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)
解脂亞羅酵母白介-1受體拮抗劑抗原Anti-CST1 Antibody人基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)
球狀枝孢整合α7抗原Anti-CST1 Antibody人基質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)
PSD95相關(guān)緊密連接蛋白PATJ抗體熒光假單胞菌人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK9蛋白抗體南方樹舌人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞
脂滴包被蛋白A+B抗體木層孔菌人甲狀腺癌細(xì)胞BHT101(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
原鈣粘蛋白β5抗體平蓋靈芝(樹舌)綠色熒光蛋白標(biāo)記人宮頸癌細(xì)胞
胚胎外胚層發(fā)育(EED)抑制劑(EED226)波楚普鏈霉 7,8,9,9-Tetradehydroisolaricires
枯草芽胞桿 6-Deoxyjacareubin
松口蘑 6',7'-Dihydroxybergamottin aceto
新月彎孢霉 4'-Demethyleucomin
解烷烴游動(dòng)微* 3-Hydroxybakuchiol
枯草芽孢桿 3,4-Secocucurbita-4,24-diene-3,2
紫紅曲 23-Hydroxymangiferonic acid
普茅斯沙雷氏 21,24-Epoxycycloartane-3,25-diol
羊無漿體(西吉株) 2",4"-Di-O-(E-p-coumaroyl)afzeli
豌豆根瘤 1-Deacetylnimbolinin B
弗吉尼亞鏈霉 14-Deoxycoleon U
黑曲霉 14-Deoxy-11-hydroxyandrographoli
血紅紅曲霉 10-O-Caffeoyl-6-epiferetoside
金針菇 (+)-Lyoniresinol 9'-O-glucoside
膠凍樣芽孢桿 Vinorine