產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Syk抑制劑(PRT062607)
英文名稱:PRT062607 Hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
PRT062607 hydrochloride是一種有效的純化的Syk抑制劑,IC50為1-2nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1370261-97-4 別名:P505-15 Hydrochloride 純度:99.20% 分子量:429.91 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
皺褶莫氏黑粉菌Snail蛋白抗體Anti-NPM1 Antibody母系蛋白4(MATN4)
費(fèi)氏中華根瘤菌分泌凋亡相關(guān)蛋白1抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白3(MATN3)
扭曲毛殼肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體Anti-NPM2 Antibody母系蛋白2(MATN2)
大腸埃希菌線粒體載體腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Anti-NPHS2 Antibody母系蛋白1(MATN1)
鏈格孢Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體Anti-NPPA Antibody墨蝶呤還原(SPR)
糞腸球菌第10號染色體開放閱讀框27抗體Anti-NPM1 Antibody(PB0329)末端脫氧核糖核轉(zhuǎn)移(DNTT)
擬青霉5-羥色受體2A抗體Anti-NPPA Antibody末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)
葛藤根瘤菌5-脂氧合抗體Anti-NPPA Antibody膜突蛋白()
赭曲霉SH2B蛋白抗體Anti-NPPB Antibody膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FPN)
枯草芽孢桿菌核突觸蛋白相互作用蛋白1抗體Anti-NPR1 Antibody膜聯(lián)蛋白A9(ANXA9)
斯氏土地桿菌磷化類固受體輔助活化因子-3Anti-NPS Antibody膜聯(lián)蛋白A8(ANXA8)
毛栓菌磷化血清應(yīng)答因子抗體Anti-NPY1R Antibody膜聯(lián)蛋白A7(ANXA7)
盤長孢狀盤孢SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NPY Antibody(PB0319)膜聯(lián)蛋白A6(ANXA6)
土生叢毛單胞菌磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NQO1 Antibody膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)
磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NR1H2 Antibody膜聯(lián)蛋白A4(ANXA4)
聚酵芽孢桿菌磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體Anti-NR1H3 Antibody膜聯(lián)蛋白A3(ANXA3)
腫瘤/睪丸抗原135抗體Sphingomonasdokdonensis人臍靜脈平滑肌細(xì)胞提取物
骨誘導(dǎo)因子抗體Herpetosiphonaurantiacus人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物
1號染色體開放閱讀框80抗體檸檬泛菌人食管平滑肌細(xì)胞提取物
耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體Chryseobacteriumlathyri人胃粘膜上皮細(xì)胞提取物
Syk抑制劑(PRT062607)釀酒酵母 三乙氧基(3-異酸基)硅Na-K-ATPElisa
檸檬形克勒克酵母 4-氨基-2,3-二甲基偶氮苯色P450Elisa
枯草芽孢桿 4-叔丁基鄰苯二酚半胱氨酸蛋白12Elisa
Hymenobacter 氨基磺酸銨心肌肌鈣蛋白ⅠElisa
地衣芽孢桿 腐草霉肌酸激同工MBElisa
蜜環(huán) 依維維生AElisa
蠟狀芽孢桿 交沙霉肌肽Elisa
香菇 紡錘二鹽酸蛋白激CElisa
馬齒莧叉梗孢 潮霉B蛋白激AElisa
托姆青霉 DL-硒代蛋氨酸基質(zhì)金屬蛋白2Elisa
Cohnella L(+)硒代蛋氨酸血影蛋白Elisa
腸桿屬 6-重氮-5-氧代-L-正白氨酸肉堿軟脂醜基轉(zhuǎn)移-IElisa
枯草芽孢桿 N-芴甲氧羰基-N'-(4-甲氧基-2,3,6-三磺?;?-L-精氨酸肉堿軟脂醜基轉(zhuǎn)移-IIElisa
豬丹絲 O-苯并三氮唑-N,N,N,N-四甲脲四氟酸酯總酯Elisa
玉蜀黍長蠕孢 水楊酸嘌呤核苷酸磷酸化Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)