vanin抑制劑(RR6)

vanin抑制劑(RR6)公司正在出售的產(chǎn)品：JAK2/FITC 熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)酪氨激JAK-2抗體IgG2-巰煙 99%
phospho-JAK2(Tyr221) /FITC 熒光標(biāo)記化蛋白酪氨激JAK-2抗體IgG浴銅靈 98%
phospho JAK2(Tyr1007+Tyr1008)/FITC 熒光標(biāo)記化蛋白酪氨激JAK-2抗體IgG浴銅靈 purified by sublima

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母小鼠Ⅰ型膠原Anti-SLC9A6 Antibody人性T淋巴相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)

硬結(jié)節(jié)桿菌人抗Anti-SLC9A7 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)

香菇人抗核糖體P蛋白抗體Anti-SLC9A3R2 Antibody人免疫球蛋白輕鏈lambda(λ-IgLC)

枯草芽孢桿菌小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽Anti-SLC9A8 Antibody人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)

薄花邊皮傘大鼠單核趨化蛋白1Anti-SLCO1B1 Antibody人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)

癭青霉小鼠可溶性P選擇Anti-SLCO1A2 Antibody人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)

蘋果鏈格孢人抗骨骼肌抗體Anti-SLIT3 Antibody人皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)

硫氧化檸檬胞菌大鼠單核趨化蛋白2Anti-SLIT2 Antibody人凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)

紅色鹽幾何形菌大鼠單核趨化蛋白3Anti-SLC9A9 Antibody人凝血血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)

布氏乳桿菌人甲狀腺抗體Anti-SMAD1 Antibody人溶血補(bǔ)體(Hc)

枇杷假尾孢小鼠S100蛋白Anti-SLU7 Antibody人溶血補(bǔ)體(Hc)

平菇小鼠白介1Anti-SLK Antibody人T受體(TCR)

枯草芽孢桿菌人胰島抗體Anti-SMAD1 Antibody人T受體(TCR)

模擬乳粉霉菌酵母菌質(zhì)控樣品(定量)大鼠巨噬集落激因子Anti-SMAD2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)

黃色粘球菌*大鼠巨噬來源的趨化因子Anti-SMARCA2 Antibody人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)

枯草芽孢桿菌人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體Anti-SMARCC2 Antibody人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)

環(huán)指蛋白98抗體血耳抗人谷光甘肽轉(zhuǎn)移單抗FMU-GST17

形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體枝孢霉皰疹病毒單抗7

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ白黃小薄孔菌（斜面）ACV1

腫瘤壞死因子受體超家族成員14抗體教酒鏈霉菌H1H8
vanin抑制劑(RR6)彎孢霉 蕎麥堿

枯草芽孢桿 七葉皂苷

埃德爾鏈霉 米那普侖鹽酸鹽

腐皮鐮孢 萊菔

嗜熱假諾氏 苦味

平菇—佛羅里達(dá) 糠酸

嗜熱淀粉芽孢桿 維丁

竹喙球 巴他賽

香草蘭根疾 咖啡

根瘤 絹毛欖仁苷

鏈格孢 聚谷紫杉

紫棕炭團(tuán) 九里香酮

草莖點(diǎn)霉 焦性沒食子酸

黑曲霉 甲基查爾酮

醬油曲霉 環(huán)巴