商品介紹:
SC144是gp130活性抑制劑,抑制人卵巢癌細(xì)胞IC50小于1uM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):895158-95-9 純度:98.02% 分子量:322.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:gp130抑制劑(SC144)
英文名稱:SC144
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
水原市土地桿菌大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽Anti-MRPL14 Antibody人生長(zhǎng)激(HGH)
乳桿菌屬人白三烯D4Anti-MRPL13 Antibody人生長(zhǎng)激(HGH)
嗜中溫寒冷桿菌小鼠抗核抗體Anti-MRPL15 Antibody人紅生成(EPO)
耐輻射奇球菌兔抑瘤MAnti-MRPL18 Antibody人紅生成(EPO)
小海綿羊肚菌小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白Anti-MRPL21 Antibody人紅生成受體(EPOR)
漢遜德巴酵母大鼠解整合樣金屬蛋白9Anti-MRPL20 Antibody人紅生成受體(EPOR)
大腸埃希氏菌人N鈣黏蛋白/神經(jīng)鈣黏蛋白Anti-MRPL24 Antibody人β-微管蛋白(TUBB)
短波單胞菌屬植物血凝Anti-MRPL22 Antibody人β-微管蛋白(TUBB)
松口蘑小鼠解整合樣金屬蛋白9Anti-MRPL24 Antibody人前列腺F2α(PGF2α)
梅奇酵母大鼠c-fosAnti-MRPL32 Antibody人前列腺F2α(PGF2α)
大腸埃希氏桿菌兔血管生成2Anti-MRPL35 Antibody人總前列腺特異抗原(tPSA)
構(gòu)巢曲霉植物生長(zhǎng)激Anti-MRPL34 Antibody人總前列腺特異抗原(tPSA)
白地霉人肝結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子Anti-MRPL39 Antibody人抗人類免疫缺陷病抗體(HIV)
阿舒假囊酵母植物凝脂Anti-MRPL40 Antibody人抗人類免疫缺陷病抗體(HIV)
雙孢蘑菇小鼠氧化型Anti-MRPL42 Antibody人解脲脲原體抗體(UU-Ab)
橄欖產(chǎn)色鏈霉菌大鼠c-jun ELISA KitAnti-MRPL42 Antibody人解脲脲原體抗體(UU-Ab)
環(huán)指蛋白146抗體亞側(cè)耳(元蘑)大鼠腹水癌細(xì)胞
RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體金針菇(黃)人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
絲蛋白激1抗體蒜頭果白地霉人T淋巴瘤細(xì)胞
RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位1抗體柿炭疽病人卵巢上皮細(xì)胞癌細(xì)胞
gp130抑制劑(SC144)博斯氏屬 N-cis-Feruloyltyramine
土星擬威爾酵母木克變種 Kaempferol 5,7,4'-trimethyl ethe
鏈霉 Epimedoside A
Jeotgalicoccus halotolerans 衡州堿,堿
輪枝孢 Ayanin
布氏白僵(卵孢白僵) 7-氧代-beta-谷甾
米氏假單胞 7-O-Methyleriodictyol
金直絲鏈霉 3-Hydroxy-3-acetonyloxindole
短小克銀漢霉 1-Methoxyindole-3-carboxylic aci
黃桿 1-Cinnamoylpyrrolidine
柑橘青霉 軟脂酸-β-香樹精酯
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 Hederagonic acid
芽孢桿 Agatharesinol acetonide
細(xì)麗毛殼 3-Deoxyzinnolide
北風(fēng)類芽孢桿 印楝