COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-2）

COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-2）公司正在出售的產(chǎn)品：KLF6/FITC 熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)染抑癌因KLF6抗體IgG異丁酮 CP,98.0%
KLF8/FITC 熒光標(biāo)記KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體IgG正 AR,99.0%
KLF9/FITC 熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子KLF9抗體IgG四 AR,99.0%
KLF13/RFLAT-1 /FITC 熒光標(biāo)記腸道內(nèi)富含的Kruppel樣

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-2）

英文名稱(chēng)：Cot inhibitor-2

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

南假單胞菌人髓過(guò)氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgGAnti-SRPK1 Antibody人過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4(C4a)

新疆鹽地桿菌人抗蛋白3抗體IgGAnti-SPTBN5 Antibody人補(bǔ)體片斷5a(C5a)

凝結(jié)芽胞桿菌大鼠B因子Anti-SPTBN1 Antibody人補(bǔ)體片斷5a(C5a)

印度洋斯塔普氏菌大鼠抑瘤MAnti-SRCIN1 Antibody人補(bǔ)體片斷3a(C3a)

大腸桿菌人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgAAnti-SRSF11 Antibody人補(bǔ)體片斷3a(C3a)

毛柄金錢(qián)菌(金針菇)人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-SRSF11 Antibody人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)

嗜糞細(xì)薄菌大鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子Anti-SRSF3 Antibody人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)

蘇云金芽孢桿菌九州亞種人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體Anti-SRSF4 Antibody人Ⅸ(FⅨ)

擴(kuò)展鐮孢大鼠正常T表達(dá)和分泌因子Anti-SS18 Antibody人Ⅸ(FⅨ)

根瘤菌人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-SRSF5 Antibody人Ⅹ(FⅩ)

苦白蹄大鼠L解Anti-SRY Antibody人Ⅹ(FⅩ)

福氏志賀氏菌人抗核小體抗體IgGAnti-SRSF4 Antibody人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

黃曲霉大鼠可溶性CD30配體Anti-SRSF7 Antibody人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)

運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌人抗硬皮病抗體70Anti-SRSF7 Antibody人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

賴(lài)芽孢桿菌大鼠可溶性CD40配體Anti-SS18 Antibody人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)

潮汐科維爾氏菌人抗SS-B/La抗體Anti-SSBP1 Antibody人凝血抗凝血復(fù)合物(TAT)

轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α抗體奧氏蜜環(huán)菌2E8A5

星形細(xì)胞瘤高表達(dá)蛋白抗體環(huán)指蛋白100紅緣擬層孔菌4B14A1

線粒體內(nèi)膜轉(zhuǎn)位抗體尖鐮孢 黃瓜專(zhuān)化型Jurkat-LTRGT

前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白猴頭菇whiov-P24C-MoAb
COT/Tpl2抑制劑（Cot inhibitor-2）小孢矛束霉 紫莖女貞苷D

乳酸乳球乳脂亞種 紫莖女貞苷C

韓國(guó)海桿狀 紫莖女貞苷B

Leifsonia shinshuensis Suzuki et al. 紫莖女貞苷A

日本根霉 梓

大腸桿 醉椒

埃切許旺酵母 植酸鋅

擬康寧木霉 植酸鈉

微小鏈霉 芝麻

藍(lán)色犁頭霉 棕櫚酸乙酯

釀酒酵母 紫蘇

枯草芽孢桿 紫蘇葶

花臉香蘑 紫杉肽

綠垂曲霉 2-乙酰基洋丁香苷

披發(fā)糖多孢 羊蹄