公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:TTK和Mps1抑制劑(CFI-402257)
英文名稱:CFI-402257
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
CFI-402257是高度選選擇性的TTK和Mps1抑制劑,Ki值分別為0.1nM和0.09nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1610759-22-2 純度:99.52% 分子量:498.58 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
蘇云金芽孢桿菌小鼠嗜性粒陽離子蛋白Anti-MRPS9 Antibody人金屬硫蛋白2(MT2)
尿八疊球菌兔子白介1可溶性受體IAnti-MRRF Antibody人金屬硫蛋白2(MT2)
西藏根瘤菌菜豆凝集Anti-MSH6 Antibody人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)
釀酒酵母人上皮粘附分子Anti-MSC Antibody人可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(sLOX-1)
腦膜炎膿性黃桿菌(P2實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)證明)大鼠白介32Anti-MRRF Antibody人3-硝基酪(3-NT)
紫丁香蘑兔鉤端螺旋體IgGAnti-MT-ND5 Antibody人3-硝基酪(3-NT)
燕麥鐮刀菌人可溶性粘附分子Anti-MSX2 Antibody人糖聚糖(GAG)
孢小克銀漢霉輪生變種扁豆凝集Anti-MTAP Antibody人糖聚糖(GAG)
黃蓋蜜環(huán)菌小鼠Qa淋巴抗原2Anti-MT-ND1 Antibody人半胱酰白三烯(CysLTs)
蜜二糖假絲酵母大鼠孕受體Anti-MT-ND5 Antibody人半胱酰白三烯(CysLTs)
糞產(chǎn)堿桿菌兔凝血原片段F1+2Anti-MTG2 Antibody人鈣腔蛋白(CALU)
谷棒桿菌蓖麻凝集Anti-MTERF1 Antibody人鈣腔蛋白(CALU)
枯草芽孢桿菌小鼠D-乳脫氫Anti-MTERF1 Antibody人載脂蛋白A5(apo-A5)
彩色豆馬勃人巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1Anti-MTNR1A Antibody人載脂蛋白A5(apo-A5)
雙孢蘑菇大鼠白介21Anti-MTIF3 Antibody人維生D結(jié)合蛋白(DBP)
柄孢殼豌豆凝集Anti-MTNR1B Antibody人維生D結(jié)合蛋白(DBP)
受體活性修飾蛋白3抗體元蘑人高轉(zhuǎn)移性乳腺癌細(xì)胞
Ras蛋白特異鳥核苷釋放因子1抗體粗毛纖孔菌人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
視網(wǎng)膜S抗原抗體樺革裥菌大鼠肝星形細(xì)胞
RB1的誘導(dǎo)卷曲蛋白RB1CC1抗體鐮霉菌人胚腎上皮包裝細(xì)胞
TTK和Mps1抑制劑(CFI-402257)溶血不動(dòng)桿基因型4 3,6-Dimethoxyapigenin
毛栓 2'-Hydroxygenistein
紡錘形毛殼 2,6-Dimethyl-3,7-octadiene-2,6-d
毛木耳(紫木耳、黃背木耳) 2,3,8-三鄰甲基鞣花酸
黑木耳(神龍A8) 14-去氧-11,12-二去氫內(nèi)酯
球孢枝孢 11(13)-去氫腋生依瓦菊
小紅酵母 1-(3,4-Dimethoxyphenyl)propane-1
畢赤酵母 β-Hydroxypropiovanillone
立枯絲核 α-育亨賓
枯草芽孢桿 原間千金藤堿
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿 p-Hydroxyphenethyl trans-ferulat
Flavihumibacter 鐵力木咕噸酮 A
毛柄(金針菇) Masticadienolic acid
屎腸球 羽扇豆鹼
皺紋單胞 異落葉松脂