以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CK2抑制劑(DMAT) | DMAT | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
DMAT是一種有效的,特異性的CK2抑制劑,IC50值為130nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):749234-11-5 別名:Casein kinase II Inhibitor;CK2 Inhibitor 純度:98.40% 分子量:476.79 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
總狀毛霉原變型雷帕霉靶蛋白復(fù)合體2抗體Anti-F2R Antibody延長蛋白4(ELP4)
枯草芽孢桿菌核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體Anti-F3 Antibody延長蛋白3(ELP3)
丁香假單胞菌周期檢控Rad17蛋白抗體(復(fù)制因子C)Anti-F3 Antibody延長蛋白2(ELP2)
米曲霉磷化周期檢控Rad17蛋白抗體Anti-F2R Antibody延伸蛋白C(ELOC)
巴氏醋桿菌受體結(jié)合絲蘇激2抗體Anti-F2RL1 Antibody延伸蛋白B(ELOB)
根瘤菌磷化受體結(jié)合絲蘇激2抗體Anti-F5 Antibody延伸蛋白A3(ELOA3)
橙鱗傘絲/蘇激p90RSK蛋白抗體Anti-F7 Antibody延伸蛋白A2(ELOA2)
松針層孔菌*染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體Anti-F8 Antibody延胡索(FUM)
棕黑腐質(zhì)霉磷化染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體Anti-F8 Antibody延胡索二酰乙酰乙水解(FAH)
綠蓋粉孢牛肝菌(都不提供)S6核糖體蛋白抗體Anti-FABP1 Antibody煙酰腺嘌呤二核苷磷(NAADP)
殼梭孢屬核糖體S6蛋白激抗體Anti-FABP1 Antibody煙受體1(NIACR1)
粉紅擲孢酵母Rad52抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體β3(CHRNβ3)
球毛殼環(huán)指蛋白150抗體Anti-FABP1 Antibody(PB0644)煙堿型受體β2(CHRNβ2)
尖孢鐮刀菌T特異性趨化因子抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體β1(CHRNβ1)
鞘單胞菌晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體α7(CHRNα7)
蠟狀芽孢桿菌環(huán)指蛋白12抗體Anti-FABP2 Antibody煙堿型受體α5(CHRNα5)
6-磷山梨脫氫抗體單增李斯特氏菌A549人肺癌細(xì)胞系
14-3-3γ抗體阿拉伯糖漢遜酵母PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化)
14-3-3σ抗體酵母PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化)
CD2F-10抗體鮮橙曲霉HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
CK2抑制劑(DMAT)稻生擲孢酵母 1%亞碲酸溶液組蛋白去乙酰化Elisa
分枝卷霉 硝酸鹽還原試劑盒Acds?;摎銭lisa
聚貪噬 V-P試劑盒6酮前列腺F1aElisa
美味側(cè)耳 胰蛋白胨血管內(nèi)皮粘附分子Elisa
白地霉 酪蛋白胨S-腺苷蛋氨酸脫羧Elisa
釀酒酵母 牛肉浸粉鳥氨酸脫羧Elisa
Bacillus acidiceler Peak et al. 細(xì)瓊脂粉鳥氨酸轉(zhuǎn)氨Elisa
枯草芽孢桿 大豆蛋白胨精氨酸脫羧Elisa
芽胞桿 蛋白胨鏈球2型抗體Elisa
短小芽孢桿 月示蛋白胨球蛋白IgGElisa
賴氏毛殼 革蘭氏染色液球蛋白IgAElisa
鹽沼鹽桿(可訂) Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒三價(jià)鏈球c型血清抗體Elisa
紅緣層孔 水楊三價(jià)鏈球7型血清抗體Elisa
伊平屋橋大洋芽孢桿 溶糖化血紅蛋白A1cElisa
嗜中溫羧酸利用桿 伏(液體)口蹄疫抗體Elisa