商品介紹:
Pluripotin(SC-1)抑制RSK2活性,EC50值為2.5±1.8μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:839707-37-8 別名:SC1 純度:98.0% 分子量:550.54 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RSK2抑制劑(Pluripotin) | Pluripotin | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
醋桿菌屬植物激脫落Anti-MYL9(Ser20) Antibody人視黃結(jié)合蛋白(RBP)
圍小叢殼菌小鼠溶菌Anti-MYLIP Antibody人視黃結(jié)合蛋白(RBP)
厚粉紅隔孢伏革菌小鼠甘油三酯Anti-MYO6 Antibody人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
洋蔥伯克霍爾德菌人含纈酪肽蛋白Anti-MYO1D Antibody人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
球孢白僵菌人可溶性CD28Anti-MYO6 Antibody人羥賴(Hyl)
蘑菇假單胞菌兔載脂蛋白B100Anti-MYO1G Antibody人羥賴(Hyl)
大腸埃希氏桿菌植物維生K1Anti-MYO9B Antibody人GTP活化蛋白(GAP)
木豆根瘤菌大鼠低密度脂蛋白Anti-MYOM1 Antibody人GTP活化蛋白(GAP)
土地桿菌屬小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白Anti-MYOD1 Antibody人載脂蛋白H(Apo-H)
仙人掌有孢漢遜酵母小鼠垂體腺苷環(huán)化激活肽Anti-MYOZ2 Antibody人載脂蛋白H(Apo-H)
硬水黃桿菌大鼠高密度脂蛋白Anti-MYOM2 Antibody人糖磷脂酰肌(GPI)
細(xì)鏈格孢植物維生B12Anti-MYSM1 Antibody人糖磷脂酰肌(GPI)
無色殼囊孢人淋巴因子Anti-MZB1 Antibody人洲商陸(PWM)
紅根須腹菌兔轉(zhuǎn)化生長因子β2Anti-MZF1 Antibody人洲商陸(PWM)
釀酒酵母兔一氧化氮合成Anti-Na+ CP type VIIIalpha Antibody人脂多糖/內(nèi)(LPS)
根癌土壤桿菌大鼠孕受體Anti-N4BP1 Antibody人脂多糖/內(nèi)(LPS)
補(bǔ)體應(yīng)答基因32抗體斑玉蕈人尿道上皮細(xì)胞
減數(shù)分裂同源蛋白1抗體香菇?9937人眼脈絡(luò)膜黑色瘤細(xì)胞
胞膜間內(nèi)質(zhì)網(wǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體多毛孢菌小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞
RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體疫霉小鼠氣道平滑肌細(xì)胞
RSK2抑制劑(Pluripotin)棒曲霉 α-Spinasterol glucoside
鏈格孢 α-Onocerol
紅酵母屬 Zederone
芽孢桿 Wighteone
云芝 氈毛洲茶
羊毛狀青霉 鴨嘴花堿,鴨嘴花粉堿
Termitomyces bulborhizus 灰葉草, 羥基魚藤
芽孢桿屬 豆甾葡萄糖甙
條紋雞樅 星魚甾
根瘤 Sinapaldehyde
枯草芽孢桿 西米杜鵑
凍土毛霉 Santamarine
蘑菇(新登) 連翹環(huán)己
黃曲霉 雞納酸
Ramlibacter henchirensis 球松查爾酮