抗酸染色液(金胺O熒光法)

抗酸染色液(金胺O熒光法)公司*的產(chǎn)品：IL-31/FITC 熒光標(biāo)記白介31抗體IgG二十八烷 standard for GC, ≥98.5% (GC)
IL-31RA/CRL3/FITC 熒光標(biāo)記白介31受體a抗體IgG二十八烷 99%
IL-32/NK4/FITC 熒光標(biāo)記白介32抗體IgG二十八烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99% (GC)
IL-33/NFHEV/FITC 熒光標(biāo)記白

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：抗酸染色液(金胺O熒光法)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：4×100ml

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

鹽伊托必利英文名稱： Sucrose phosphorylase from L. Mesenteroides蛋白磷2Cα抗體包裝25g

鹽依普拉英文名稱： Sulfamethazine sodium salt磷化樁蛋白Paxillin抗體包裝5g

鹽乙哌立松英文名稱： Sulfobromophthalein disodium salt hydrate神經(jīng)胞漿蛋白9.5抗體（蛋白基因產(chǎn)物9.5）包裝1g

鹽異英文名稱： Sulfo-MBS磷化蛋白激Aβ抗體包裝25g

鹽異腎上腺(進(jìn)口)英文名稱： Tetraheptylammonium bromide蛋白激A受體2α亞基抗體包裝5g

鹽異腎上腺（國(guó)產(chǎn))英文名稱： Tetrapropylammonium hydroxide 25% solution磷化蛋白激A受體2α亞基抗體包裝1g

鹽右美托咪定英文名稱： Thapsigargin, from Thapsia garganica蛋白激Aγ抗體包裝5g

鹽左西替利英文名稱： Thioflavin T蛋白激受體相關(guān)1β抗體包裝1g

鹽左旋咪唑英文名稱： Thiolutin from Streptomyces luteosporeusB淋巴誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體包裝250mg

葉綠銅鈉鹽英文名稱： Thionin磷化酪磷α抗體包裝5g

伊班膦鈉英文名稱： Thiosalicylic acid蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體包裝100g

伊潘立英文名稱： Thiostrepton from Streptomyces azureus磷化酪磷α抗體包裝25g

伊屈潑帕;艾曲波帕英文名稱： ThorinPDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體包裝500g

伊索拉定英文名稱： Thymine磷脂磷解1抗體包裝5g

依達(dá)拉奉英文名稱： Timentin抑癌基因p16/p14/P19抗體包裝1g

伊拉克固氮螺菌Azospirillum irakense 質(zhì)量規(guī)格：BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉純度＞99.95% 胱天蛋白9試劑盒蘆丁(+)-三合蕓香苷-對(duì)照品;有報(bào)告

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白8試劑盒靛藍(lán);有報(bào)告-對(duì)照品;有報(bào)告

霍氏腸桿菌Enterobacter│hormaechei 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品胱天蛋白-5試劑盒沒(méi)食子-對(duì)照品;有報(bào)告
抗酸染色液(金胺O熒光法)枯草芽孢桿 2-羥基-3-溴-6-磷酸化α；β水解域包含蛋白5Elisa

釀酒酵母 2--3-氟-6-磷酸化圍脂滴蛋白Elisa

立枯絲核 2-溴-6-甲基-3-硝基吡啶堿性磷酸Elisa

韓國(guó)靈芝 Boc-DL-氨酸乙酰酯Elisa

玫瑰栗色鏈霉 四甲基氟化銨谷氨酸脫羧Elisa

側(cè)耳屬 3-(甲基磺酰基)苯基酸γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨Elisa

桿狀毛霉 3-羥基-4,4,4-三氟丁酸乙酯補(bǔ)體因子DElisa

囊軸發(fā)仙囊軸亞種 喹啉-4-酸磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa

微核鏈霉 3,4,5-三羧酸苯二酸單酰Elisa

須芒草伯克霍爾德氏 7-羥基庚酸腎Elisa

樣品粉碎機(jī) (-)-二甲基-2,3-鄰異亞基-L-酯周期依賴性激抑制因子1AElisa

產(chǎn)紫青霉 甘氨酰-L-氨酸色P4503A4Elisa

大腸埃希 2-溴-4-羥基吡啶補(bǔ)體片段Elisa

蘑菇 3-硝基鄰苯二卵清蛋白IgG1抗體Elisa

Burkholderia anthina 1-氧雜螺[2.5]辛烷-2-甲卵清蛋白IgG2a抗體Elisa