PI3K和mTOR抑制劑(GDC-0084)

PI3K和mTOR抑制劑(GDC-0084)公司正在出售的產(chǎn)品：BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光標記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG硫鋅,七水 ACS, 99%
BrdU/FITC 熒光標記溴脫氧尿苷抗體IgG硫鋅,七水 植物培養(yǎng)級,99.5%
SMARCA4/SNF2 beta/FITC 熒光標記抑癌因SNF2β抗體IgG化鋅 AR，98%
BRMS-1/FITC

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
猴頭菇血管緊張轉(zhuǎn)換(抗原)Anti-CXCL8 Antibody人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)

班戈錯湖嗜鹽堿紅菌整合alpha E2抗原Anti-CYB5R1 Antibody人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)

新疆鹽地桿菌巨噬表面分子抗原Anti-CYC1 Antibody人巨噬集落激因子(M-CSF)

楊奇青霉v-maf 肌腱膜纖維肉瘤癌基因同源物A抗原Anti-CYB5A Antibody人巨噬集落激因子(M-CSF)

長雙歧桿菌嬰兒亞種黑色瘤相關(guān)Anti-Cyclin C Antibody人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)

鏈格孢絲裂原活化蛋白激激1抗原Anti-CYFIP2 Antibody人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)

金黃色葡萄球菌RN4220凋亡信號調(diào)節(jié)激1/絲裂原活化蛋白激激激5抗原Anti-CYP20A1 Antibody人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)

芽孢桿菌屬抑癌基因抗原Anti-Cyclin C Antibody人單核趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)

鹽生鹽古桿菌蛋白裂解（一種新的癌基因）抗原Anti-CYP21 Antibody人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)

紅細菌人巨病UL49抗原Anti-CYP26A1 Antibody人單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)

芥鏈格孢黑皮質(zhì)-1受體抗原Anti-CYP27A1 Antibody人L選擇(L-Selectin/CD62L)

Bacillus anthracis髓樣白血病-1抗原Anti-CYP26C1 Antibody人L選擇(L-Selectin/CD62L)

小弧菌多藥耐藥蛋白抗原Anti-CYP2A6V2 Antibody人白介9(IL-9)

皺紋單胞菌肌增強因子2抗原Anti-CYP2A13 Antibody人白介9(IL-9)

側(cè)耳線粒體融合蛋白1Anti-CYP2A6V2 Antibody人白介8(IL-8/CXCL8)

疣孢漆斑菌金屬硫蛋白抗原Anti-CYP2A7 Antibody人白介8(IL-8/CXCL8)

多腺苷二磷多聚3抗體/多聚ADP-核糖聚合3淡天藍色鏈霉菌大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)

多腺苷二磷多聚4抗體/多聚ADP-核糖聚合4抗生鏈霉菌人肝內(nèi)膽管上皮細胞

肽聚糖識別蛋白1抗體大麗花輪枝孢人顱骨成骨細胞

前細胞脹亡受體誘導(dǎo)膜損傷蛋白抗體出芽短梗霉小鼠神經(jīng)干細胞
PI3K和mTOR抑制劑(GDC-0084)野油菜黃單孢 Isodeoxyelephantopin

熒光假單胞 胡蔓藤堿甲

釀酒酵母 Humantenidine

綠孢環(huán)柄菇 Hirsutanonol 5-O-glucoside

星狀諾氏 Hautriwaic acid

白靈側(cè)耳 Goniodiol 8-acetate

大腸埃希 鉤吻綠堿

Pilidium sp. Garjasmin

空腸彎曲桿 Gancaonin M

米曲霉 Euphroside

鑲邊鏈霉 Erythrabyssin II

蘇云金芽孢桿 毛萼乙

褐囊蜜環(huán) 環(huán)氧表國鵝掌楸內(nèi)酯

阿爾及亞盤多毛孢 Durantoside II

黑曲霉 Durantoside I