src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)

src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)公司*的產(chǎn)品：Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit 人免疫球蛋白j鏈(R)-4-苯-2-惡唑烷酮 98%
HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit 人血紅蛋白β亞(S)-4-苯-2-惡唑烷酮 98%
SIgA(Hu

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)

英文名稱(chēng)：1-Naphthyl PP1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

腐皮鐮刀菌分泌粒蛋白3抗體Anti-FABP6 Antibody血型糖蛋白A(GYPA)

pRK415肺表面活性蛋白B抗體Anti-FAF1 Antibody血小板因子4V1(PF4V1)

金黃色葡萄球菌金黃亞種src原癌基因抗體Anti-Factor H/Cfh Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子受體樣蛋白(PDGFRL)

植物乳桿菌生精凋亡相關(guān)基因4抗體Anti-FADD Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β(PDGFRβ)

高盧蜜環(huán)菌神經(jīng)肌肉接頭蛋白SNTA1抗體Anti-FANK1 Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子受體α(PDGFRα)

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌內(nèi)膜抗體Anti-FANK1 Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子D(PDGFD)

密叢毛霉富含亮重復(fù)蛋白SHOC2抗體Anti-FANK1 Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子C(PDGFC)

膠孢分化蛋白SEPT14抗體Anti-FAP Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGFBB)

籬邊粘褶菌離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體Anti-FASLG Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子B(PDGFB)

叢毛紅曲鈣結(jié)合線(xiàn)粒體載體蛋白抗體Anti-FAS Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGFAB)

墻支頂孢鈉離子肌轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Anti-FAS Antibody血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGFAA)

酵母肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體Anti-FASLG Antibody(PB0042)血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGFA)

食菌屬胞漿蛋白SH3GL3抗體Anti-FAS Antibody血小板親和蛋白4(PKP4)

假委內(nèi)瑞拉鏈霉菌三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體Anti-FAS Antibody(PB0241)血小板親和蛋白3(PKP3)

釀酒酵母神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK2抗體Anti-FASN Antibody(PB0909)血小板親和蛋白2(PKP2)

薄層桿菌神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK3抗體Anti-FBXL4 Antibody血小板親和蛋白1(PKP1)

固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體蛹蟲(chóng)草（北冬蟲(chóng)夏草、北蟲(chóng)草）H9C2大鼠心肌細(xì)胞

類(lèi)泛蛋白3抗體杏鮑菇（斜面）HepG2人肝癌細(xì)胞

線(xiàn)粒體二羧載體蛋白11抗體福氏志賀氏菌HEp-2人喉表皮癌細(xì)胞

線(xiàn)粒體內(nèi)鈣結(jié)合天冬/谷載體蛋白抗體Bacilluspsychrophilus=SporosarcinapsychrophilaK562人慢性骨髓性白血病細(xì)胞
src家族抑制劑(1-Naphthyl PP1)副凝聚小短桿 血液增培養(yǎng)基程序性死亡因子配體1抗體Elisa

酮叢毛單胞 血液瓊脂基礎(chǔ)凝血因子X(jué)IIIElisa

稻平臍蠕孢 克氏雙糖鐵瓊脂8異前列腺Elisa

艾丁湖喜鹽芽孢桿 中國(guó)藍(lán)瓊脂單核趨化蛋白1Elisa

近似臘蘑 MH瓊脂（MHA）多巴Elisa

枝狀枝孢 MH肉湯（MHB）γ-氨基丁酸Elisa

球孢白僵 三糖鐵瓊脂（TSI）性鼻炎抗原Elisa

多殺性巴氏桿 改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基Ⅲ型膠原Elisa

乳酸乳球乳亞種 改良馬丁培養(yǎng)基I型膠原Elisa

大腸埃希 硝酸鹽胨水培養(yǎng)基口蹄疫抗凝抗體Elisa

三葉草根瘤 胰蛋白胨水培養(yǎng)基胃泌Elisa

弗雷德里克斯堡假單胞 磷酸鹽葡萄糖胨水培養(yǎng)基氫--ATPElisa

阿穆?tīng)査箍藶雏}地桿 真瓊脂培養(yǎng)基繁殖與呼吸綜合征病抗體Elisa

人纖維單胞 MUG培養(yǎng)基腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa

燕麥?zhǔn)人嵛鞴蟻喎N* 5號(hào)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子AElisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)