TOPK抑制劑(OTS514)

TOPK抑制劑(OTS514)公司*的產(chǎn)品：BSEP/FITC 熒光標(biāo)記膽汁鹽輸出泵蛋白抗體IgG化鋅 99.99% metals basis
BSP/FITC 熒光標(biāo)記骨涎蛋白抗體IgG化鋅 99.999% metals basis
Goat human C3/FITC 熒光標(biāo)記羊抗人補(bǔ)體C3 IgG化鋅 用于培養(yǎng)、昆蟲培養(yǎng)，98%
C5a/FITC 熒光標(biāo)記過敏C5a（補(bǔ)體C5a

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：TOPK抑制劑(OTS514)

英文名稱：OTS514

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

玉米大斑病菌層粘連蛋白受體1抗體Anti-CYP2C18 Antibody人白介6(IL-6)

三色革裥菌層粘連蛋白受體1抗原（C端）Anti-CYP2C19 Antibody人白介6(IL-6)

冷桿菌屬中期因子/肝結(jié)合生長因子抗原Anti-CYP2D6 Antibody人白介-5(IL-5)

蘇云金芽孢桿菌庫爾斯塔克亞種肌球蛋白輕鏈3抗原Anti-CYP2J2 Antibody人白介-5(IL-5)

相思根瘤菌巨噬移動(dòng)抑制因子抗原Anti-CYP2S1 Antibody人白介4(IL-4)

沙雷氏菌巨噬炎癥因子1β 抗原Anti-CYP2R1 Antibody人白介4(IL-4)

波多野氏微桿菌CD122/白介2受體β鏈抗原Anti-CYP2W1 Antibody人白介3(IL-3)

腓特烈斯堡分枝桿菌巨噬炎癥蛋白2抗原Anti-CYP2U1 Antibody人白介3(IL-3)

釀酒酵母基質(zhì)金屬蛋白13抗原Anti-CYP39A1 Antibody人白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )

赭曲霉基質(zhì)金屬蛋白20抗原Anti-CYP4A11 Antibody人白介2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )

Burkholderia sp. 基質(zhì)金屬蛋白-17抗原Anti-CYP3A4 Antibody人白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

雜色曲霉基質(zhì)金屬蛋白-26抗原Anti-CYP4B1 Antibody人白介2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)

Asticcacaulis?基質(zhì)金屬蛋白-9抗原Anti-CYP3A7 Antibody人白介2(IL-2)

中國農(nóng)大湖積物桿菌基質(zhì)金屬蛋白-10抗原Anti-CYP4F11 Antibody人白介2(IL-2)

克魯斯假絲酵母髓過氧化物抗原Anti-CYP4F2 Antibody人白介1α(IL-1α )

多藥耐藥相關(guān)蛋白2Anti-CYP4Z1 Antibody人白介1α(IL-1α )

磷二酯4A8抗體黃曲霉人卵巢顆粒細(xì)胞

原鈣粘蛋白β7抗體土曲霉人正常子宮頸上皮細(xì)胞

原鈣粘蛋白γA3抗體桔青霉大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

蛋白Z抗體大毛霉人源口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系
TOPK抑制劑(OTS514)傳染性喉氣管炎病 Dihydrosesamin

微球 (-)-白玉蘭亭B

松杉靈芝 Demethoxycapillarisin

糞腸球 去氫克班寧

維氏鞘氨單胞 Deacetylxylopic acid

蘋果黑腐皮殼 Dammar-20(21)-ene-3β,24,25-triol

粗糙鏈孢霉* Cycloolivil

棒狀乳桿棒狀亞種 桐

硬結(jié)節(jié)桿 3-鼠李糖苷兒茶

甜菜蛇眼病莖點(diǎn)霉 螺

布氏假單胞 Broussonin B

耐久腸球 望春玉蘭脂 C

棲河屬 Auriculasin

多主葡萄殼 Andropanoside

楷米干酪 Andropanolide