商品介紹:
AZD2461是新型PARP抑制劑,能夠避免由Pgp介導(dǎo)的olaparib抗性。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1174043-16-3 純度:98.12% 分子量:395.43 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
PARP抑制劑(AZD-2461) | AZD-2461 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
黑曲霉多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗原Anti-CYP4V2 Antibody人白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)
枯斑擬盤多毛孢線粒體核糖體蛋白L28(抗原)Anti-CYP4X1 Antibody人白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)
暗黃紫色小單孢菌錯(cuò)配修復(fù)蛋白1抗原Anti-CYP8B1 Antibody人白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)
HLE(人肝癌(未分化))胃粘液抗原Anti-CYTH3 Antibody人白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)
根瘤菌褪黑受體1B抗原Anti-CYP8B1 Antibody人白介16(IL-16)
根瘤菌胃動(dòng)多肽Anti-CYSLTR2 Antibody人白介16(IL-16)
貝氏隱飽子蟲雷帕霉靶蛋白Anti-CYSLTR1 Antibody人白介13(IL-13)
鐮刀菌粘蛋白-1/上皮膜Anti-CYTIP Antibody人白介13(IL-13)
甘藍(lán)黑腐病禾谷類致病變種髓樣分化蛋白抗原Anti-DAAM1 Antibody人白介12(IL-12/P70)
大腸埃希氏菌周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗原Anti-CYTIP Antibody人白介12(IL-12/P70)
黃綠青霉MYSM1抗原Anti-DAB1 Antibody人白介12(IL-12/P40)
果生鏈核盤菌MYOZ抗原Anti-CYTL1 Antibody人白介12(IL-12/P40)
大腸埃希氏桿菌煙堿型乙酰受體α7(多肽)Anti-Cytochrome P450 3A43 Antibody人白介11(IL-11)
細(xì)鏈格孢玉蘭?;透申P(guān)鍵蛋白(多肽)Anti-DAP Antibody人白介11(IL-11)
孟氏假單胞菌納曲偶聯(lián)牛血清白蛋白:納曲偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-DACT1 Antibody人白介10(IL-10)
大腸埃希氏桿菌核小體組裝蛋白1(多肽)Anti-DAXX Antibody人白介10(IL-10)
蛋白S抗體五通橋毛霉小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞
肝再生磷酯2抗體亮白曲霉人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞
CyclinA1相互作用蛋白抗體康寧木霉人甲狀腺癌細(xì)胞B-CPAP(干細(xì)胞庫(kù)保藏)
多囊腎蛋白1抗體中華根霉人多發(fā)性骨髓瘤外周血B淋巴細(xì)胞
PARP抑制劑(AZD-2461)黑木耳 Aliarin
中慢生華癸根瘤 9α,13α-Epidioxyabiet-8(14)-en-18
食砜節(jié)桿 8-羥基-4-蓽澄茄烯-3-酮
戊糖乳桿 8-Epideoxyloganic acid
桃木腐層孔 7-O-Acetyl-4-O-demethylpolysypho
實(shí)腐莖點(diǎn)霉 6a-Hydroxymedicarpin
交鏈孢 5'-Prenylaliarin
土地黃桿 3'-Geranyl-3-prenyl-2',4',5,7-te
開菲爾乳桿 3-乙酰氧基-8(17),13E-勞丹二烯-15-酸
南方異擔(dān)子 2-Oxokolavelool
淡紫擬青霉 27-Hydroxymangiferolic acid
氧化節(jié)桿 24,25-Dihydroxydammar-20-en-3-on
灰葡萄孢 23-Hydroxybetulin
普通紅色桿 20-Deoxyingenol 3-angelate
地衣芽孢桿 2,3-Dihydroisoginkgetin