商品介紹:
CI-1040(PD184352)是高度特異的MEK小分子抑制劑,對MEK1的IC50值為17nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:212631-79-3 別名:PD 184352 純度:99.72% 分子量:478.66 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:MEK小分子抑制劑(CI-1040)
英文名稱:CI-1040
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
中國克魯維酵母淋巴管內(nèi)皮和血管內(nèi)皮受體1抗體Anti-Ferritin Antibody血栓烷受體(TP)
露濕漆斑菌鞭毛蛋白2抗體Anti-FES Antibody血栓A2(TXA2)
硬結(jié)節(jié)桿菌跨膜蛋白SEMA5A抗體Anti-FFAR1 Antibody血色病蛋白(HFE)
香菇IQCJ抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)
糞腸球菌*SH2結(jié)構(gòu)域蛋白C3抗體Anti-FGA Antibody血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)
日本色鹽桿菌2型豬鏈球菌溶血抗體Anti-FGB Antibody血漿過氧化物(GPX3)
解鳥克雷伯菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合2(HO2)
綠色鏈霉菌肺表面活性蛋白A抗體Anti-FGF1 Antibody血紅氧合1(HO1)
多粘類芽孢桿菌葡萄糖-6磷轉(zhuǎn)運蛋白抗體Anti-FGF1 Antibody血紅結(jié)合蛋白(HPX)
枯草芽孢桿菌線粒體琥珀脫氫D抗體Anti-FGF1 Antibody血紅蛋白μ(HBμ)
叢毛紅曲類固硫酯抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白θ1(HBθ1)
腐質(zhì)霉固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白抗體Anti-FGF10 Antibody血紅蛋白ζ(HBζ)
傘枝犁頭霉轉(zhuǎn)運蛋白家族39成員7抗體Anti-FGF13 Antibody血紅蛋白ε1(HBε1)
迪吉氏黃桿菌碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4-A4突變型抗體Anti-Fgf19(Fgf15) Antibody血紅蛋白δ(HBδ)
木賊鐮刀菌磷化認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白SynGAP抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ2(HBγ2)
Sphingobium fuliginis Syndecan 3蛋白抗體Anti-FGF19 Antibody血紅蛋白γ1(HBγ1)
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體空腸彎曲菌hFoB1.19:SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白5抗體液化沙雷氏菌MGC80-3人胃癌細(xì)胞
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白6抗體黑曲霉 ACHN人腎癌細(xì)胞
SLAMF6抗體淺白隱球酵母3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞
MEK小分子抑制劑(CI-1040)新月彎孢 酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)白介12Elisa
大腸埃希 真培養(yǎng)基硒蛋白P1Elisa
節(jié)桿 液體硫乙酸鹽培養(yǎng)基(不含瓊脂)瘟病抗體Elisa
黃傘 TTC卵磷脂-吐溫80-營養(yǎng)瓊脂流行性腹瀉病IgG抗體Elisa
弗氏檸檬酸桿 綠膿測定用假單胞瓊脂培養(yǎng)基(PAP)流行性腹瀉病IgA抗體Elisa
黑曲霉 甘露發(fā)酵培養(yǎng)基藍(lán)耳病病GP5蛋白抗體Elisa
枯草芽胞桿 十六烷基溴化銨瓊脂血管緊張IElisa
雜色曲霉 乙酰瓊脂血糖Elisa
棘托竹蓀 卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂促甲狀腺Elisa
植物乳桿 SCDLP液體培養(yǎng)基Lys63特異性去泛化BRCC36Elisa
大腸埃希 錳鹽營養(yǎng)瓊脂口蹄疫VP1結(jié)構(gòu)蛋白Elisa
球孢白僵 麥芽浸膏湯去泛化Elisa
膠凍樣芽胞桿 溴甲酚紫葡萄糖肉湯分泌型球蛋白MElisa
Dyella sp. 牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)沉默調(diào)節(jié)蛋白1Elisa
葡枝根霉 萘啶酮酸(4.0mg)沉默調(diào)節(jié)蛋白2Elisa