CHK1抑制劑(CCT244747)

CHK1抑制劑(CCT244747)公司*的產(chǎn)品：LAG-3/CD223/FITC 熒光標(biāo)記淋巴活化因-3抗體IgG二吡咯烷(N-琥珀酰亞氨氧)碳六氟鹽 98%
lamin A/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白A抗體IgG代二苯酯 97%
Laminin Beta1/FITC 熒光標(biāo)記層粘連蛋白β1抗體IgTPyU 純度≥98%
lamin B/FITC 熒光標(biāo)記核纖層蛋白B抗體IgG

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CHK1抑制劑(CCT244747)

英文名稱：CCT244747

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

迪維爾希氏菌屬大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2Anti-SYCP3 Antibody人組織因子(TF)

蘇云金芽孢桿菌蘇云金亞種大鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1Anti-SYCP2 Antibody人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)

釀酒酵母人抗丁型肝炎病抗體Anti-SVOP Antibody人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)

弗氏鏈霉菌人抗型肝炎病抗體Anti-SYK Antibody人血小板因子4(PF-4/CXCL4)

釀酒酵母大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Anti-SYT11 Antibody人血小板因子4(PF-4/CXCL4)

釀酒酵母人抗斑疹傷寒抗體Anti-SYT16 Antibody人淋巴功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)

雙乳突炭層菌大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Anti-SYT13 Antibody人淋巴功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)

大腸埃希菌人單核增多性李斯特菌OAnti-SYNE3 Antibody人白三烯E4(LTE4)

大腸埃希氏桿菌大鼠肝生長(zhǎng)因子Anti-SYT11 Antibody人白三烯E4(LTE4)

冷湖黃桿菌人乙型肝炎病X抗原Anti-SYT13 Antibody人D二聚體(D2D)

赫倫魏斯氏菌大鼠糖蛋白130Anti-TAAR5 Antibody人D二聚體(D2D)

淡紫擬青霉大鼠生長(zhǎng)激Anti-SYTL4 Antibody人免疫球蛋白E(IgE)

一色齒毛菌人腺相關(guān)病Anti-TAAR3P Antibody人免疫球蛋白E(IgE)

耐輻射奇球菌大鼠粒集落激因子Anti-TAB3 Antibody人髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)

黃曲霉人乙型肝炎病X蛋白相互作用蛋白Anti-TACC3 Antibody人髓系觸發(fā)受體-1(TREM-1)

*芽胞桿菌（Bacillus atrophaeus）ATCC 9372；（曾用名：枯草芽胞桿菌黑色變種）人傷寒抗原Anti-TADA2A Antibody人白調(diào)節(jié)(LR)

環(huán)指蛋白9抗體棱柱散尾菌中國(guó)倉(cāng)鼠X小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤

酪相關(guān)蛋白1抗體納豆芽孢桿菌小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞

腫瘤血管內(nèi)皮標(biāo)志物8抗體惡疫霉HBL-1細(xì)胞*培養(yǎng)基

tinagl1抗體桑殼小圓孢菌無(wú)血清凍存液 Cell Freezing Medium
CHK1抑制劑(CCT244747)乳酸乳球乳亞種 右旋四氫巴馬

銅綠假單胞 原百部次堿

香菇 原百部堿

藤黃微球 雅姆皂苷元

太平洋楊惠芳氏 3-乙酸南楝屬二酯

維涅蘭德固氮 乙?；湮恫軦

匿名曲霉 羽扇烯酮

薛瓦酵母 葉綠

枯草芽孢桿枯草亞種 鹽酸

根瘤 異甜菊

盤(pán)長(zhǎng)孢狀盤(pán)孢 野鷲尾苷

釀酒酵母 3－乙酰基乳香酸

鏈霉（白色類(lèi)群） *泊苷

釀酒酵母 鹽酸羅酮

瘤胃脫硫腸狀 鹽酸吡酮