商品介紹:
SR9009是一種REV-ERBα/β激動劑,作用于REV-ERBα和REV-ERBβ,IC50分別為670nM和800nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1379686-30-2 純度:98.55% 分子量:437.94 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:REV-ERBα/β激動劑(SR9009)
英文名稱:SR9009
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
球孢白僵菌原鈣粘蛋白γA3抗體Anti-AGER Antibody(PB0530)蛋白 DJ-1(PARK7)
杏鮑菇血小板源性生長因子BB抗體Anti-AGFG1 Antibody彈性蛋白(Elastase)
枯草芽孢桿菌枯草亞種胰島促進(jìn)因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白)Anti-AGO1 Antibody彈性蛋白(ELN)
枝彎孢乙?;?/span>P53(Lys382)抗體Anti-AGO2 Antibody膽(Cholic acid)
圓酵母屬磷化過氧化活化增生受體γ抗體Anti-AGO4 Antibody膽(CA)
蘋果輪紋病磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AGRP Antibody膽囊收縮/縮膽囊八肽(CCK-8)
小單孢菌腺苷環(huán)化激活肽受體1抗體Anti-AGRN Antibody膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)
鼠傷寒沙門氏菌關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體Anti-AGR2 Antibody膽囊收縮(CCK)
栗疫菌血小板活化因子抗體Anti-AGT Antibody轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)
假單胞菌蛋白激活受體-1抗體Anti-AHR Antibody乙酰轉(zhuǎn)移(ChAT)
利古里亞游動放線菌蛋白激活受體-2抗體Anti-AGT Antibody乙?;?CHAc)
釀酒酵母蛋白活化受體4抗體Anti-AHR Antibody磷甘油酯(PC/CPG)
豬布魯氏菌多腺苷二磷多聚抗體/多聚ADP-核糖聚合1Anti-AGTR1 Antibody膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
蠟狀芽孢桿菌配對盒基因3抗體Anti-AHR Antibody膽固7α-羥化(CYP7A)
釀酒酵母配對盒基因8抗體Anti-AGTR1 Antibody膽固(CH)
貝萊斯芽胞桿菌配對盒基因9抗體Anti-AHR Antibody單絲蛋白激1(LIMK1)
凍膠假絲酵母Candida│gelidadi 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分
越南芽胞桿菌Bacillus│vietnamensis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
糞腸球菌Enterococcus│faecalis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
REV-ERBα/β激動劑(SR9009)釀酒酵母 2-乙?;邕虬捉?5Elisa
固氮 2,6-二-4-三氟乳糖Elisa
豇豆慢生根瘤 1,4-丁二二縮水甘油銅藍(lán)蛋白Elisa
松口蘑 代十四烷苯氨酸Elisa
詹氏酸桿 李氏增肉湯(LB1)溶血磷脂酰Elisa
棲砂桿 李氏增肉湯(LB2)維生DElisa
輪蟲弧 5-氨基煙酸抗人心肌肌鈣蛋白抗體Elisa
動物乳桿 10%胰蛋白胨大豆肉湯抗人肌紅蛋白抗體Elisa
淡紫擬青霉 10%胰酪胨大豆肉湯纖溶原Elisa
伯頓擬內(nèi)孢霉 月桂基硫酸鹽蛋白胨肉湯LST管(雙料,含小導(dǎo)管)弓形蟲Elisa
褐環(huán)粘蓋牛肝 0.85%無鹽水(10ml/支)抗脊髓灰質(zhì)炎Virues1-3 IgG抗體Elisa
研究團(tuán)隊(duì)谷氨酸桿 2-氨基-3,5-二溴吡抗傷寒Vi多糖IgG抗體Elisa
噬纖維 0.85%無鹽水(9ml/支)抗傷寒Vi多糖IgM抗體Elisa
蘇云金芽孢桿 3%堿性蛋白胨水白脂Elisa
大腸埃希氏 緩沖蛋白胨水(BPW)音猬因子Elisa