商品介紹:
Asciminib(ABL001)是一種有效和選擇性的變構(gòu)Bcr-Abl抑制劑;抑制Ba/F3細(xì)胞生長的IC50值為0.25nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1492952-76-7 別名:ABL001 純度:98.75% 分子量:449.84 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
油桐盾殼霉人流行性乙型腦炎抗體IgGAnti-TAS2R5 Antibody人胰島自身抗體(IAA)
柔毛鏈霉菌大鼠βAnti-TAS2R8 Antibody人谷脫羧(GAD)
尖孢鐮刀菌人Anti-TBL2 Antibody人谷脫羧(GAD)
秀珍菇大鼠血管生成2Anti-TBPL2 Antibody人(TP-5)
蠟狀芽孢桿菌大鼠血管生成1Anti-TBC1D3 Antibody人(TP-5)
蘇云金芽孢桿菌松蠋亞種人不耐熱腸B亞單位Anti-TBX1 Antibody人(Thymosin)
鏈霉鏈霉菌人沙眼衣原體抗體Anti-TBX10 Antibody人(Thymosin)
枯草芽孢桿菌大鼠血管生長Anti-TBX18 Antibody人未磷化類胰島生長因子結(jié)合蛋白-1
膠孢鐮孢人血吸蟲Anti-TBX18 Antibody人未磷化類胰島生長因子結(jié)合蛋白-1
蘇云金芽孢桿菌大鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體Anti-TBX15 Antibody人甲狀旁腺激樣蛋白(PLP)
釀酒酵母人輪狀病抗原Anti-TBX18 Antibody人甲狀旁腺激樣蛋白(PLP)
卵形巴貝斯蟲(文縣株)大鼠角化內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白Anti-TBX22 Antibody人內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
白令海芽孢桿菌大鼠Anti-TBX3 Antibody人內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)
梨生囊孢殼人軍團(tuán)菌抗原Anti-TCEAL1 Antibody人apelin 12(AP12)ELISA Ki
澳型核果褐腐病菌人大腸菌Anti-TBXT Antibody人apelin 12(AP12)ELISA Ki
地衣芽孢桿菌大鼠白活化黏附因子Anti-TCEAL3 Antibody人葡萄糖依賴性胰島釋放多肽(GIP)
質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白1抗體黑腐皮殼菌SH-SY5Y 完培/500ml
尿苷酰二磷葡萄糖焦磷化2抗體茄鐮孢細(xì)胞專用培養(yǎng)基
泛結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體放射形根瘤菌抗腫瘤壞死因子α小鼠7
UL16結(jié)合蛋白3抗體左旋乳芽孢進(jìn)口分裝血清
變構(gòu)Bcr-Abl抑制劑(Asciminib)釀酒酵母 香蘭
斜臥青霉
串珠鐮孢* 衛(wèi)矛
釀酒酵母 環(huán)戊烯二酮甲
產(chǎn)黑色鏈霉 環(huán)戊烯二酮
土芽胞桿 無梗五加苷B
大西洋魯杰氏
單胞 烏苯司
邊緣假單胞防風(fēng)致病變種 吳茱萸新堿
放射形根瘤 無水檸檬酸
蘑菇 土克甾酮
地中海新殼梭孢 甜菊雙糖苷
Flavitalea 土貝母苷
苜蓿中華根瘤 土貝母苷
長白山黑木耳 脫氫海堿