IGF-1R自磷酸化抑制劑(AG1024)

IGF-1R自磷酸化抑制劑(AG1024)公司正在出售的產(chǎn)品： Beta-endorphin/FITC 熒光標(biāo)記人、大、小鼠、羊、牛beta內(nèi)啡肽抗體IgG托布津 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ENPP1/PC-1/FITC 熒光標(biāo)記抗核苷內(nèi)焦/二酯1抗體IgG酯 98%
EGFL7/FITC 熒光標(biāo)記抗脈管發(fā)育(組裝)蛋白抗體IgG酯 99%
Phospho-EGFR(Tyr1045) /FITC 熒光標(biāo)

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
松杉靈芝大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激Anti-NDRG4 Antibody人組織蛋白K(cath-K)

葡萄座腔菌大鼠檸檬合Anti-NDUFA4L2 Antibody人組織蛋白K(cath-K)

釀酒酵母兔子血小板因子4Anti-NDUFA9 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)

爪哇鏈霉菌植物維生CAnti-NDUFA4L2 Antibody人骨形成蛋白(BMPs)

矩圓黑盤孢小鼠胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6Anti-NDUFA8 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

sto128(大球蓋菇)人集落激因子Anti-NDUFB1 Antibody人視黃結(jié)合蛋白4(RBP-4)

灰藍(lán)毛霉兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白Anti-NDUFB9 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)

污水溶桿菌人γ干擾誘導(dǎo)單核因子Anti-NDUFS5 Antibody人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體(PLP)

深紅酵母α-銀環(huán)蛇Anti-NDUFB10 Antibody人垂草扁桃(VMA)

煙曲霉小鼠巨噬炎性蛋白1δAnti-NDUFA9 Antibody人垂草扁桃(VMA)

黑曲霉大鼠L-鼠乳脫氫Anti-NDUFC2 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)

腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型大鼠脂酰合成Anti-NDUFV3 Antibody人葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)

黑曲霉人肥胖抑制Anti-NECTIN1 Antibody人血凝(HA)

根瘤菌屬小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-NDUFV2 Antibody人血凝(HA)

克魯斯假絲酵母兔子中性粒彈性蛋白Anti-NECAB3 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)

枯草芽胞桿菌枯草亞種蘇云金芽孢桿菌蛋白Anti-NECTIN2 Antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)

鳥核苷交換因子抗體黑荊樹根瘤菌人膀胱癌細(xì)胞（2014年9月新引進(jìn)）（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

核糖體結(jié)合因子RBFA抗體中國(guó)臺(tái)灣相思根瘤菌人絨毛膜癌細(xì)胞

環(huán)指蛋白166抗體南洋楹根瘤菌小鼠白血病克細(xì)胞系

環(huán)指蛋白19B抗體假木豆根瘤菌人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
IGF-1R自磷酸化抑制劑(AG1024)米曲霉 脫氧鴨嘴花堿酮

波多黎各鹽幾何形 Communic acid

匿名曲霉 丁香三環(huán)烷二

溝鞭藻赫夫勒氏 羥基大黃

蘇云金芽孢桿 羥基大黃

節(jié)桿 乙酸(肉)桂酯

大腸埃希氏 貓眼草 D

釀酒酵母 啤酒甾

銅綠假單胞 洋椿苦

大豆慢生根瘤 梓木內(nèi)酯

簡(jiǎn)單青霉 Biorobin

大腸埃希 內(nèi)酯苷

黃傘 alpha-Spinasterol acetate

大田鞘氨盒 Agatholal

蒼白桿屬 阿夫兒茶精