人乳腺成纖維原代細胞

人乳腺成纖維原代細胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代乳腺成纖維細胞 人黑色素瘤細胞 英文名稱： MV3 RBL-1 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞 1ml/T75 人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL C2C12 小鼠成肌細胞 小鼠原代肝內(nèi)膽管上皮細胞

人乳腺成纖維原代細胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

人乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織；乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間，淺筋膜伸向乳腺組織內(nèi)形成條索狀的小葉間隔，一端連于胸肌筋膜，另一端連于皮膚，將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復(fù)經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結(jié)締組織伸入乳腺組織之間，形成許多間隔，這些纖維結(jié)締組織對乳房起固定作用，而纖維結(jié)締組織是由成纖維細胞構(gòu)成的。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介：

公司實驗室分離的人乳腺成纖維細胞采用蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人乳腺成纖維細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

P815 小鼠肥大細胞癌細胞  tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5 蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL  小型豬腎細胞;MPK  HEL人紅白細胞白血病細胞 HEL human erythroleukemia cells RPMI-1640 兔原代毛囊角質(zhì)細胞 兔原代子宮成纖維細胞

NIS(Na+/I-symporter;NIS 0.5mgNIS(Na+/I-symporter;NIS) 碘轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)

IGSF8 Protein Human 重組人 PGRL / IGSF8 蛋白

ANGPTL1重組狗 ANGPTL1 / Angiopoietin-like 1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FLRT2 Protein Mouse 重組小鼠 FLRT2 蛋白

CSK重組人 CSK / C-Src kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

大鼠顆粒酶A(GZMA)試劑盒 ，英文名： GZMA ELISA Kit

Mouse apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 小鼠載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒

RatPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFSH促卵泡生成素

細胞環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量試劑盒20次

RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠孤兒受體配體   英文名稱：   Mouse Aemin   規(guī)格：      英文縮寫：   A

小鼠α葡萄糖苷酶   英文名稱：   Mouse α Glucosidase   規(guī)格：      英文縮寫：   AG

小鼠雄激素   英文名稱：   Mouse Androgen   規(guī)格：      英文縮寫：   ADG

酰基氧化酶   英文名稱：   Mouse Acyl-CoA oxidase   規(guī)格：      英文縮寫：   ACO

人乳腺成纖維原代細胞豚鼠血清總補體(CH50)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human hepatitis E virus IgG (HEV-IgG) ELISA Kit 人戊型肝病毒IgG(HEV-IgG)試劑盒

Humanα-Endomorphin,α-EPELISAKit 人α-內(nèi)肽(α-EP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCP試劑盒人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次

humanProstaglandinE1，PG-E1ELISAKit人前列腺素E1(PGE1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CA9重組狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 蛋白 Protein

OAT-3(Organic anion transporter 3 0.5mgOAT-3(Organic anion transporter 3) 陰離子轉(zhuǎn)運蛋白-3(抗原)

CA13重組人 Carbonic Anhydrase XIII / CA13 蛋白 Protein

EIF5A2 Protein Human 重組人 EIF5A2 蛋白

CTSH Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin H / CTSH 蛋白