人結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

人結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：人原代結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 食管癌 英文名稱： KYSE510 P388D1（IL-1） 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 1ml/T75 Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 HES 人胚皮膚成纖維樣細(xì)胞 小鼠原代胚胎干細(xì)胞

人結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞主要分布于黏膜肌層和肌層的內(nèi)環(huán)形、外縱行平滑??；結(jié)腸運動少而緩慢，對刺激的反應(yīng)也較遲緩。結(jié)腸平滑肌在食物消化與吸收、腸道運動和物質(zhì)分泌、誘發(fā)全身炎癥反應(yīng)以及細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等研究中起著重要的作用。結(jié)腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細(xì)胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。結(jié)腸平滑肌運動活性受到神經(jīng)遞質(zhì)、胃腸激素和藥物等因素的調(diào)節(jié)。隨著現(xiàn)代胃腸動力學(xué)研究的進展，對胃腸運動的研究已從器官、組織水平發(fā)展到細(xì)胞、分子水平，要求在胃腸道單個平滑肌細(xì)胞標(biāo)本上來完成各種電生理、藥理和分子生物學(xué)等實驗。體外培養(yǎng)細(xì)胞，由于影響因素單一，是研究細(xì)胞功能以及相應(yīng)的細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的基礎(chǔ)。

方法簡介：

公司實驗室分離的人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請按照以下方法進行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

NCI-H157細(xì)胞，人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 小鼠肉瘤細(xì)胞,S-180細(xì)胞 CM-R039大鼠胃粘膜上皮細(xì)胞EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液   人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 兔原代乳腺上皮細(xì)胞 大鼠原代腦微血管周細(xì)胞

Integrin alpha V 巨噬細(xì)胞來源的趨化因子αV多肽 0.5mgIntegrin alpha V 巨噬細(xì)胞來源的趨化因子αV多肽

ESD Protein Human 重組人 Esterase D / ESD 蛋白

COLEC12重組食蟹猴 CLP1 / COLEC12 蛋白 Protein

CD55 Protein Mouse 重組小鼠 CD55 / DAF 蛋白

CST1重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白 Protein

大鼠絡(luò)絲蛋白(RL)試劑盒 ，英文名： RL ELISA Kit

Mouse insulin like growth factor binding protein 2 (IGFBP-2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)試劑盒

RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGDNF(Humanglialcellline-derivedneuroophicfactor)ELISAKIT人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子

細(xì)胞肝脂酶活性比色法定量試劑盒20次

Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit大鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素 -12 (mouse IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 Biosource

人結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞小鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human tetanus aibody (Tetanus Ab) ELISA Kit 人破傷風(fēng)抗體(Tetanus Ab)試劑盒

Humanfattyacid-bindingprotein,FABPELISAKit 人脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAcetylcholinesterase,AChE試劑盒人乙酰酯酶(AChE)試劑盒規(guī)格：96T/48T

正常人體腎組織S9組分(5毫克/毫升)500微升

Mouseai-cardiolipinaibodyIgG,ACA-IgGELISAKit小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)

LALBA重組人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白