人原代肺微血管平滑肌

人原代肺微血管平滑肌

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人肺血管平滑肌細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應(yīng)；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關(guān)鍵因素，新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應(yīng)，并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān)。

方法簡介：

公司實驗室分離的人肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人肺微血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白 (His 標(biāo)簽)  HEC-1-B(人內(nèi)膜腺癌細胞)     人永生化淋巴細胞;CNLMG-B5537LC  SMC-1細胞，人胸膜瘤細胞 沙門氏菌Ta98 大鼠肝細胞瘤 兔原代腎足細胞 兔原代單核細胞

CD133 造血干細胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細胞抗原CD133

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白

SERPINA7重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

DKKL1重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

大鼠內(nèi)皮細胞TEK酪酸激酶(Tie2)試劑盒 ，英文名： Tie2 ELISA Kit

Monkey high sensitive C reactive protein (hs-CRP) ELISA Kit 猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒

Ratcatecholamine,CAELISAKit 大鼠兒茶酚胺(CA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGLP-1(human)人胰高血糖素樣肽1

細胞馮庫薩(VONKOSSA)鈣染色試劑盒50次

RatsolubleVascuolarcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)試劑盒   96T/48T

小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒   96T/48T

人原代肺微血管平滑肌小鼠卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 大鼠膠原酶II(Collagenase II)試劑盒

HumanPerforin/Pore-formingprotein,PF/PFPELISAKit 人穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAM試劑盒人白細胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

脂質(zhì)過氧化物4-羥基壬烯酸(4-HNE)ELISA定量測定試劑盒48/96次

Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

阿黑皮素原(POMC)重組蛋白 Recombinant Proopiomelanocortin (POMC)

AIF1重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 Protein

CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白