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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 11:27:19瀏覽次數(shù)：570
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T|1000T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9588 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱(chēng) | XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱(chēng)：XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑
英文名稱(chēng)：XTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Kit
產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
XTT(二甲氧唑黃)是一種類(lèi)似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，活細(xì)胞線(xiàn)粒體中存在與輔酶Ⅱ相關(guān)的脫氫酶，可將黃色的XTT 還原成水溶性的橘黃色的甲臜。生成的甲月贊能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，不形成顆粒，可直接用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀檢測(cè)定吸光值。 操作方法 1. 96 孔板加入細(xì)胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時(shí)。2.加入適當(dāng)濃度的受試化合物。3.將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。 4. 向各孔中加入50 μl 的XTT 檢測(cè)工作液。 5. 37℃下孵育1~4 小時(shí)。 6. 酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度。 結(jié)果分析 1. 細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加X(jué)TT 工作液，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加X(jué)TT 工作液，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100 2. 求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
III型前膠原基末端肽(PⅢNP)英文名稱(chēng)：PⅢNP ELISA KitBcl2相互作用蛋白1抗體（轉(zhuǎn)化相關(guān)基因8蛋白）包裝100g
G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)英文名稱(chēng)：GPBAR1 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體包裝25g
GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)英文名稱(chēng)：GATA4 ELISA Kit骨形態(tài)發(fā)生蛋白15抗體包裝1g
FMS樣酪激3配體(Flt3L)英文名稱(chēng)：Flt3L ELISA KitBcl-2樣蛋白2抗體包裝250mg
FMS樣酪激3(Flt3)英文名稱(chēng)：Flt3 ELISA Kit殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體包裝5g
FAM84A蛋白(FAM84A)英文名稱(chēng)：FAM84A ELISA KitBcl-2抗體包裝25g
FAM172A蛋白(FAM172A)英文名稱(chēng)：FAM172A ELISA Kit腦轉(zhuǎn)錄因子4蛋白抗體包裝5g
E選擇(E-Selectin/CD62E)英文名稱(chēng)：E-Selectin/CD62E ELISA Kit膽鹽激活脂肪抗體包裝1mg
E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)英文名稱(chēng)：E-Cad ELISA Kit3-羥丁脫氫抗體包裝25g
E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)英文名稱(chēng)：TRIM68 ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪?；饪贵w包裝5g
D-乳脫氫(D-LDH)英文名稱(chēng)：D-LDH ELISA Kit磷化癌易感基因1抗體包裝10mg
D二聚體(D2D)英文名稱(chēng)：D2D ELISA Kit磷化β分泌抗體包裝50mg
DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)英文名稱(chēng)：DNMT3B ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝1g
DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)英文名稱(chēng)：DNMT3A ELISA Kit磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體包裝25g
DNA(胞嘧啶-5)基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)英文名稱(chēng)：DNMT1 ELISA Kit磷化Bcl-2抗體包裝5g
芳香乙酰脫乙?；鶚拥鞍?/span>2抗體肝核因子1β(HNF1β)LCL161 is an orally bioavailable second mitochondrial-derived activator of caspa
XTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑ATCC 10211 氧基硅醌氧化還原酶1檢測(cè)試劑盒
斜頂 4-二基丁縮二甲賴(lài)氨酰氧化酶檢測(cè)試劑盒
相思根瘤 2-(基硅基)噻吩酪氨酸蛋白激酶檢測(cè)試劑盒
聚貪氏 3,5-二叔丁基水楊酸酪氨酸蛋白激酶受體A2檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 對(duì)甲草酸二酯酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體檢測(cè)試劑盒
Nocardioides 4-乙氧基-1-萘甲酸酪氨酸激酶檢測(cè)試劑盒
非脫羧勒克 N-叔丁氧羰基-5-溴酪氨酸激酶2檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 2,8-二甲基-2,3,4,5-四氫-1H-吡啶并[4,3-b]酪氨酸激酶受體檢測(cè)試劑盒
球孢白僵 6-羥基吡啶-2-羧酸酪氨酸酶檢測(cè)試劑盒
赭色擲孢酵母 9,9-二辛基芴-2,7-雙(酸頻哪酯)酪氨酸羥化酶檢測(cè)試劑盒
釀酒酵母 N-環(huán)戊基甘氨酸甲酯鹽酸鹽酪氨酰DNA 磷酸二酯酶1檢測(cè)試劑盒
美澳型核果褐腐病 鄰芐氧苯酪酪肽；多肽YY檢測(cè)試劑盒
耶納農(nóng)球 4,6-二甲基-2-庚酮雷帕霉素靶蛋白檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 3,4-二羥基噻吩-2,5-二羧酸二乙酯類(lèi)白抗原C檢測(cè)試劑盒
Bacillus tequilensis 4-氯-3-甲基吡啶鹽酸鹽
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
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