詳細介紹
商品介紹:
TG003是高效的Clk1/Sty抑制劑,抑制Clk1和Clk4的IC50值分別為20和15nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:719277-26-6 純度:99.00% 分子量:249.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
TG003 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
氣單胞菌人CD4分子Anti-NEK5 Antibody人葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)
紅平紅球菌兔骨堿性磷 ELISA 試劑盒Anti-NEK5 Antibody人葡萄糖轉運蛋白1(GLUT1)
玫瑰庫克氏菌人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白Anti-NEK9 Antibody人低密度脂蛋白(LDL)
薄層菌屬小鼠粘蛋白/粘液5ACAnti-NEMF Antibody人低密度脂蛋白(LDL)
醬油曲霉大鼠乙酰酯Anti-NEU2 Antibody人花生四烯(AA)
黑布施泰因芽孢桿菌兔骨鈣 Anti-NEURL2 Antibody人花生四烯(AA)
地霉雙足囊菌大鼠糖缺失性轉鐵蛋白Anti-NEURL1 Antibody人骨涎蛋白(BSP)
毛頭鬼傘(雞腿菇)人角化生長因子Anti-NEMF Antibody人骨涎蛋白(BSP)
Idiomarina woesei小鼠血管緊張轉化Anti-Nestin Antibody人骨堿性磷(BALP)
脲放線桿菌人血小板衍生生長因子BBAnti-NEUROD2 Antibody人骨堿性磷(BALP)
大洋芽孢桿菌小鼠血管緊張ⅡAnti-NF1 Antibody人環(huán)磷酰(CTX)
葉片微桿菌大鼠總膽汁Anti-NF-Y Antibody人環(huán)磷酰(CTX)
嗜熱脂肪地芽孢桿菌大鼠β2微球蛋白Anti-Neuronal Calcium Sensor 1 Antibody人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)
根霉小鼠抗甲狀腺過氧化物抗體Anti-NFATC3 Antibody人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)
嗜熱鏈球菌人CXC趨化因子配體16Anti-NFE4 Antibody人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)
土地芽孢桿菌大鼠視黃結合蛋白Anti-NFAT5 Antibody人1,5-脫水葡萄糖/1,5-脫水山梨(1,5-AG)
環(huán)指蛋白23抗體麗胡枝子根瘤菌小鼠腎上腺皮質瘤細胞
環(huán)指蛋白24抗體毛胡枝子根瘤菌人大細胞肺癌細胞
環(huán)指蛋白25抗體葛藤根瘤菌人甲狀腺鱗癌細胞
環(huán)指蛋白31抗體禾草離蠕孢人咽鱗癌細胞
Clk1/Sty抑制劑(TG003)白假絲酵母 亞硫酸
釀酒酵母 化
腸球屬
小腸腸球 酸
大隱球酵母 碳酸氫
水井坊氨基酸桿 硫酸鋁
弗雷德里克斯堡假單胞 草酸
釀酒酵母 硫酸亞鐵
茄類鐮刀 硫酸鐵
榴紅鏈霉 檸檬酸
Marisediminicola 磷酸
四脊曲霉 磷酸烯酮酸單環(huán)己鹽
塔賓曲霉 鉬酸
海洋桿 四正丁基化
黑曲霉 四正丁基化