AhR激動(dòng)劑(Indole-3-carbinol)

AhR激動(dòng)劑(Indole-3-carbinol)公司*的產(chǎn)品：Anti-OAT-1/FITC 熒光素標(biāo)記陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(抗人)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗雞IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
胞漿-5′-核苷酸酶-Ⅱ抗體 Anti-C

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：AhR激動(dòng)劑(Indole-3-carbinol)

英文名稱：Indole-3-carbinol

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|200mg|1g

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

綠針假單胞菌綠針亞種Sporobolomyces bannaensis

串珠鐮孢Sporobolomyces bannaensis

盤長孢狀盤孢Sporobolomyces bannaensis

5#---2號(hào)(梨形灰包)Lipomyces starkeyi

哈茨木霉Candida krusei

短小芽孢桿菌Candida rugopelliculosa

類芽孢桿菌屬Saccharomyces exiguus

金黃殼囊孢菌Candida kefyr

釀酒酵母Candida tropicalis

蒼白鹽八疊球菌Sporobolomyces bannaensis

褐孢大禿馬勃Sporobolomyces sp.

乳桿菌屬Saccharomyces cerevisiae

甘家湖擬諾氏菌Sporobolomyces odoratus

棲土曲霉Candida pseudointermedia

聚多曲霉Hanseniaspora uvarum

李色鏈霉菌Pichia kluyveri

小鼠基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒性神經(jīng)鞘磷脂抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) 毛蕊異黃苷

小鼠基質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B)免疫試劑盒腺核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體人抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA) 茅蒼術(shù)

小鼠基質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8)免疫試劑盒肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV) 沒食子兒茶

小鼠基質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2抗體人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV) 沒食子兒茶沒食子酯
AhR激動(dòng)劑(Indole-3-carbinol)ZSWIM2 英文名稱： E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 0.2ml

DUSP7 英文名稱： 雙特異性蛋白磷酸酶7抗體 0.2ml

N-甲基嘌呤DNA糖基化酶 Anti-APNG/MPG 0.1ml

Anti- Alpha-AF/ Alpha-Afa/FITC 熒光素標(biāo)記α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-Eph receptor A2+A3+A4 (Tyr588 + Tyr596) 磷酸化內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶A2+A3+A4抗體 規(guī)格 0.1ml

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg