HIV蛋白酶抑制劑（Darunavir）

HIV蛋白酶抑制劑（Darunavir）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-SEK1/MKK4/FITC 熒光素標(biāo)記原活化蛋白激酶激酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TGF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)移生長因子–α抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAM18

以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
滿山紅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Byakangelicol基質(zhì)金屬蛋白-17抗體包裝25g

蔓荊子黃（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Byakangelicin膜突蛋白抗體包裝5g

芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (?)-Bilobalide麻疹病融合蛋白抗體包裝25g

芒果葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Peucedanol紅膜蛋白55抗體包裝5g

莽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cyclopamine膜相關(guān)環(huán)指蛋白5抗體包裝1g

貓爪草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Betulin磷化肌增強因子2C抗體包裝250mg

毛大丁草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Betulin線粒體核糖體蛋白MRP63抗體包裝5g

毛冬青（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Betulinaldehyde磷化肌增強因子2C抗體包裝1g

毛冬青皂苷A英文名稱： Betulinic acid基質(zhì)金屬蛋白13抗體包裝25g

毛萼結(jié)晶;毛萼晶A英文名稱： Betulinic acid酪單氧化微管相關(guān)蛋白MICAL抗體包裝5g

毛萼乙英文名稱： Dimethylfraxetin梅克爾-格魯伯綜合征相關(guān)蛋白抗體包裝25g

毛鉤藤堿英文名稱： Atractylenolide I突變的黑色瘤相關(guān)抗原1抗體包裝5g

毛訶子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Atractylenolide III黑色瘤相關(guān)抗原10抗體包裝1g

毛花苷C英文名稱： Anemoside B4絲裂原活化蛋白激激2抗體包裝25g

毛蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Patchouli alcoholG蛋白偶聯(lián)受體24抗體包裝5g

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：BS抗菌肽試劑盒莪術(shù);Curcumol

韓中類芽孢桿菌Paenibacillus│chungangensis 質(zhì)量規(guī)格：BS抗菌肽試劑盒二氫楊梅;Dihydromyricet

草木樨中華根瘤菌Ensifer│meliloti (Dangeard) Young 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR抗巨病試劑盒二氫槲皮;Taxifolin
HIV蛋白酶抑制劑（Darunavir）整合樣金屬蛋白與凝血10型抗體胱天蛋白5(CASP-5)檢測試劑盒CASP-5 ELISA Kit

嘌呤嘧啶核內(nèi)切2抗體胱天蛋白3(Casp-3)檢測試劑盒Casp-3 ELISA Kit

神經(jīng)絲蛋白抗體胱天蛋白10(CASP-10)檢測試劑盒CASP-10 ELISA Kit

β淀粉樣肽（1-28）抗體骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒ON ELISA Kit

有絲分裂激B抗體骨形成蛋白6(BMP-6)檢測試劑盒BMP-6 ELISA Kit

軟骨蛋白聚糖抗體骨形成蛋白(BMPs)檢測試劑盒BMPs ELISA Kit

去整合樣金屬蛋白10抗體骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒BSP ELISA Kit

含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)檢測試劑盒CTX-2 ELISA Kit

含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體骨特異性性磷B(ALP-B)檢測試劑盒ALP-B ELISA Kit