PI3Kδ抑制劑(AMG319)

PI3Kδ抑制劑(AMG319)公司*的產(chǎn)品：P53/FITC 熒光標記腫瘤抑制因抗體（野生型P53）IgG羥萘藍 IND,94%(HPLC)
Mtp53/FITC 熒光標記突變型P53抗體IgG對羥苯鈉 CP,98%
P53(wt-p53)/FITC 熒光標記腫瘤抑制因抗體（野生型P53）IgG鉻鉛 AR,98.0%
wtp53/FITC 熒光標記野生型p53單克隆抗體IgG二酰

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PI3Kδ抑制劑(AMG319)

英文名稱：AMG319

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細胞生物學研究有以下幾個方面：

細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調控；

⑤細胞分化及其調控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

曲霉屬人B因子Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠膽固酯轉移蛋白(CETP)

貝倫格葡萄座腔菌人類白抗原GBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促黃體激(LH)

乳桿菌人補體片斷3bBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠促黃體激(LH)

橙黃硬皮馬勃人補體片斷4bBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張原(aGT)

雅致放射毛霉人補體片斷4dBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠血管緊張原(aGT)

松口蘑人補體片斷5bBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)

澳型核果褐腐病菌人免疫球蛋白重鏈Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)

Subsaxibacter arcticus人免疫球蛋白重鏈可變區(qū)Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠絨毛膜促性腺激(CG)

短桿菌屬人多免疫球蛋白受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠絨毛膜促性腺激(CG)

耐乳桿菌人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二(MDA)

谷棒桿菌Ⅰ型人表面膜免疫球蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠二(MDA)

Botryosphaeria obtusa人免疫球蛋白j鏈Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠超氧化物歧化(SOD)

佛雷德里克斯堡假單胞菌人血紅蛋白β亞基Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠超氧化物歧化(SOD)

糙皮側耳人分泌型免疫球蛋白ABacillus subtilis subsp. subtilis小鼠C肽(C-Peptide)

淡紫擬青霉人分泌型免疫球蛋白A（人唾液）Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠C肽(C-Peptide)

泡盛曲霉人活化ⅫBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)

ZSWIM3蛋白抗體約氏不動桿菌抗鼠CD8單克細胞

鋅指/環(huán)指蛋白4抗體沙雷氏菌荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞

鋅指蛋白828抗體氧化節(jié)桿菌人胚腎293細胞

鋅指蛋白3抗體火針層孔菌水牛皮膚成纖維樣細胞
PI3Kδ抑制劑(AMG319)長雙歧桿 鹽酸洛貝林

地衣芽孢桿 纈氨霉

釀酒酵母 衣霉

反硝化芽生桿 乳酸甲氧芐啶

短波單胞 甲氧芐啶

金福菇 三生

平菇2000（京瑞） 星孢

果生核盤 巴韋林

泡盛曲霉 鹽酸前黃

釀酒酵母 氧酸

根瘤 硝基妥因

橢孢小隔指孢 格爾德霉

奧托氏屬 雙氫鏈霉

平臍蠕孢 色苷酸鈉

佛雷德里克斯堡假單胞 烏苯司 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)