公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:DYRK抑制劑(ID-8)
英文名稱:ID-8
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
ID-8是DYRK抑制劑,長時間培養(yǎng)可維持胚胎干細(xì)胞的自我更新。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:147591-46-6 純度:98.0% 分子量:298.29 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
紅色蠟?zāi)?/span>Pseudomonas fluorescens大鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)
黑根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
米根霉Pseudomonas fluorescens大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)
釀酒酵母Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
阿舒多囊霉Pseudomonas fluorescens大鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)
蓋氏假單胞菌Pseudomonas fluorescens大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
伯克霍爾德氏菌屬Pseudomonas fluorescens大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成3(eNOS-3)
膠孢Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
生活飲用水 大腸埃希氏菌Pseudomonas fluorescens大鼠膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)
青霉 Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張原(aGT)
類銀白紫絲膜菌Pseudomonas fluorescens大鼠血管緊張原(aGT)
Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
黑木耳Pseudomonas fluorescens大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)
損蘑菇紫色桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
枯草芽胞桿菌Pseudomonas fluorescens大鼠二(MDA)
洛斯里被毛孢Pseudomonas fluorescens大鼠超氧化物歧化(SOD)
蛋白酪磷-1B抗體芒果囊孢菌屬過氧化氫(CAT)比色法測試盒
野生型P53誘導(dǎo)基因1單克抗體紅褐肉座菌過氧化物(GSH-Px)比色法測試盒
蛋白質(zhì)精甲基轉(zhuǎn)移1抗體松色二胞菌過氧化物(POD)比色法測試盒(測植物)
磷化蛋白激樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激抗體柳屬半明小黑腐皮殼菌抗壞血過氧化物(APX)比色法測試盒
DYRK抑制劑(ID-8)熱帶假絲酵母 羧甲基葡聚糖凝膠C-25
香菇 葡聚糖凝膠LH-60
球毛殼 纖細(xì)
嗜熱脂肪地芽胞桿 葡聚糖凝膠LH-20
球形芽孢桿 表小檗堿
波茨坦短芽孢桿 葡聚糖凝膠G-200
爪哇漏斗狀側(cè)耳(鳳尾菇) 地榆皂苷II
耐寒短桿 葡聚糖凝膠G-150
斐濟球腔 地榆皂苷I
釀酒酵母 葡聚糖凝膠G-100
根瘤 葡聚糖凝膠G-75
無二酸檸檬酸桿 葡聚糖凝膠G-50
干酪 葡聚糖凝膠G-25
德氏乳桿保加亞亞種 葡聚糖凝膠G-15
費希爾曲霉 葡聚糖凝膠G-10