商品介紹:
Ellagic Acid是可通透細(xì)胞的酪蛋白激酶2(CK2)抑制劑,Ki為20nM,是抗氧化劑和抗突變劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:476-66-4 純度:99.92% 分子量:302.19 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CK2抑制劑(Ellagic acid)
英文名稱:Ellagic acid
產(chǎn)品規(guī)格:1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
假乙熱厭氧桿狀菌Pseudomonas luteola大鼠血管緊張Ⅰ(Ang-Ⅰ)
死亡谷芽孢桿菌Pseudomonas luteola大鼠黑色抗體(MC Ab)
枯草芽孢桿菌Pseudomonas marginalis大鼠黑色抗體(MC Ab)
小紅酵母Pseudomonas marginalis大鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
紅皮堿線菌Pseudomonas marginalis大鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)
污黑腐皮殼Pseudomonas marginalis大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
團(tuán)炭角菌Pseudomonas marginalis大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
球孢白僵菌Pseudomonas marginalis pv. margnalis大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
地衣形芽孢桿菌Pseudomonas marginalis pv. margnalis大鼠過敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)
根癌土壤桿菌Pseudomonas marginalis pv. alfalfa大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)
芽孢桿菌Pseudomonas marginalis pv. pastinacae大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)
解藻弧菌Pseudomonas marginalis大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)
液化根霉Pseudomonas marginalis pv. pastinacae大鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)
三葉草根瘤菌Pseudomonas marginata大鼠卵泡抑(FS)
灰褐鏈霉菌Pseudomonas mendocina大鼠卵泡抑(FS)
芽胞桿菌Pseudomonas mendocina大鼠組織蛋白去乙?;?HD)
一種腫瘤抑制基因抗體C端葉點(diǎn)霉屬一氧化氮(NO)比色法測試盒
血小板活化因子受體抗體農(nóng)業(yè)微生物菌種農(nóng)業(yè)微生物菌種農(nóng)業(yè)微生物菌種亞硝鹽比色法測試盒
干擾誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體異型酒香酵母總(T-GSH)/氧化型(GSSG)比色法測試盒
抑制/腫瘤抑制因子抗體忍冬木層孔菌總抗氧化能力(T-AOC)比色法測試盒(ABTS催化法)
CK2抑制劑(Ellagic acid)桑殼小圓孢 羧甲基纖維
鹽紅 原堿
根瘤 羥甲基纖維
短波單胞屬 去芹菜糖桔梗皂苷D
枯草芽孢桿 甲基纖維
大腸埃希 甲基纖維
根瘤屬 (-)-丁香樹脂-4-O-β-D-芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷
凱斯特鞘氨單胞 甲基纖維
相思根瘤 甲基纖維
枯草芽孢桿 化木蘭花堿
乳粉 金黃色葡萄球(陰性) 微晶纖維
棘腐霉 鹽酸黃柏堿
禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病 寡聚脫氧胸苷纖維
龜裂鏈霉龜裂亞種 瓊脂糖
大腸埃希氏桿 絞股藍(lán)皂苷XLIX