MET/AXL/MER和FGFR1/2/3抑制劑（S49076）

MET/AXL/MER和FGFR1/2/3抑制劑（S49076）公司*的產(chǎn)品：Anti-phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea IgG 兔抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodie

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MET/AXL/MER和FGFR1/2/3抑制劑（S49076）

英文名稱：S49076

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

聚貪噬菌Lactobacillus rhamnosus

安洛小皮傘(鬼毛針)Lactobacillus rhamnosus

粗柄羊肚菌Natrinema sp.

嗜冷海桿菌Natrinema sp.

假諾氏菌Haloterrigena sp.

釀酒酵母Planococcus citreus

蒼白桿菌屬Haloterrigena saccharevitans

茄鏈格孢Natrinema altunense

動物雙歧桿菌Halobiforma sp.

彩色豆馬勃Halobiforma lacisalsi

多粘類芽胞桿菌Serratia marcescens

江西諾氏菌Photobacterium phosphoreum

愛媛類芽孢桿菌Bacillus megetarium

蒼白鹽八疊球菌Ruegeria atlantica

枯草芽孢桿菌Stappia slulata

雜色曲霉Gluconobacter thailandicus

磷化嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體副流感嗜血桿菌游動放線菌屬

磷化絲/蘇蛋白激IIβcaseinkinaseIIβ抗體蟾蜍分枝桿菌玉米離蠕孢

磷化5-脂氧合抗體田鼠分枝桿菌銀色鏈霉菌

磷化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體禽腺病毒（1型）印度斯坦鏈異壁菌
MET/AXL/MER和FGFR1/2/3抑制劑（S49076）ZNF146 英文名稱： 鋅指蛋白146抗體 0.2ml

DHFR 英文名稱： 二氫葉酸還原酶抗體 0.1ml

ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗體 Anti-Arfaptin 1 0.1ml

Anti-CD167a(DDR1)/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記CD167a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

ECE1(Endothelin Converting Enzyme 1) 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg