TrkA抑制劑（GW 441756）

TrkA抑制劑（GW 441756）公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) /FITC 熒光標(biāo)記化單絲氨蛋白激1/2抗體IgG維生B12 98%
Lingo-1/FITC 熒光標(biāo)記Nogo受體作用蛋白抗體IgG3-溴-1,1,1-三氟酮 97%
LIR-6/CD85i/LILRA1/FITC 熒光標(biāo)記白免疫球蛋白樣受體6抗體IgG5-溴

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
寡養(yǎng)單胞菌屬人輪狀病IgMAnti-TLK2 Antibody人小表皮粘蛋白(SBEM)

淺玫瑰小單孢菌大鼠遲現(xiàn)抗原Anti-TLR1 Antibody 人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)

枯草芽孢桿菌大鼠降鈣Anti-TMBIM1 Antibody人類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)

Bacillus pervagus人艾柯病IgMAnti-TLR13 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)

環(huán)帶青霉人抗呼吸道合胞病抗體Anti-TMBIM1 Antibody人類粘蛋白2(ORM2)

棉尾孢大鼠骨鈣/骨谷蛋白Anti-TMBIM1 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)

金直絲鏈霉菌大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基Anti-TMBIM4 Antibody人MAX二聚化蛋白1(mxd1)

釀酒酵母人麻疹病IgMAnti-TMC8 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)

肺形側(cè)耳人柯薩奇病IgMAnti-TMEM101 Antibody人水閘蛋白14(CLDN14)

泡盛曲霉大鼠促甲狀腺Anti-TMEM145 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)

大腸埃希氏菌大鼠皮質(zhì)Anti-TMEM101 Antibody人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集3(Lgals3)

糞纖維單胞菌人柯薩奇病IgGAnti-TMEM173 Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)

枯草芽孢桿菌大鼠雌二Anti-TMEM185A Antibody人主要穹窿蛋白(MVP)

短乳桿菌人結(jié)核菌桿抗體IgGAnti-TMEM30B Antibody人泛蛋白D(UBD)

紅球菌人瘢痕性天皰瘡抗體Anti-TMEM237 Antibody人泛蛋白D(UBD)

生癌腸桿菌大鼠脫氫表雄硫酯Anti-TMEM30CP Antibody人toll樣受體2(TLR2)

神經(jīng)突起生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子受體UNC5D抗體蘇云金芽孢桿菌黑克亞種抗孕7

神經(jīng)突起生長(zhǎng)誘導(dǎo)因子受體Unc5a抗體蘇云金芽孢桿菌幕蟲亞種抗睪小鼠7

UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體蘇云金芽孢桿菌以色列亞種抗型肝炎病毒NS5抗原單克抗體7株

泛硫酯L3抗體蘇云金芽孢桿菌日本亞種抗戍型肝炎病毒單克抗體7株
TrkA抑制劑（GW 441756）枯草芽孢桿 水甘草堿

白靈側(cè)耳 沙蟾精

光神農(nóng)球 三十烷

種中心 生活飲用水耐熱大腸群質(zhì)控樣品（多管發(fā)酵法） Ⅳ

香菇 Ⅲ

寬鱗大孔 Ⅱ

茯苓 Ⅰ

淺黃假單胞 三聚

黑木耳(雜310) 3,4,5-氧基

植物內(nèi)芽孢桿 3,4,5-氧基甲酯

層出鐮孢 

樹舌4-2 肉蓯蓉苷A

白蠟多年臥孔 瑞香二甲

茶藨子葡萄座腔 瑞香-7-甲

釀酒酵母 人參皂苷Rk3