PPM1D抑制劑（CCT007093）

PPM1D抑制劑（CCT007093）公司*的產(chǎn)品：anti-PDI/FITC 熒光素標記蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Avidin/FITC 熒光素標記親合素Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
表皮生長因子受體抗體 Anti-EGF-R 0.1ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PPM1D抑制劑（CCT007093）

英文名稱：CCT007093

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細胞核、染色體以及基因表達的研究；

②生物膜與細胞器的研究；

③細胞骨架體系的研究；

④細胞增殖及其調(diào)控；

⑤細胞分化及其調(diào)控；

⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細胞的起源與進化；

⑧細胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

大腸桿菌Rhodococcus equi

草木棲劍菌Halomonas sp.

海桑小單孢菌Paenibacillus polymyxa

釀酒酵母Corynebacterium minutissimum

忠清南道鹽單胞菌Cryobacterium psychrophilum

嗜礦泉氣單胞菌Haloarcula argentinensis

海洋桿菌Halorubrum trapanicum

粗毛纖孔菌Haloarcula quadrata

彎孢菌Pseudomonas fluorescens

芽孢桿菌Pseudomonas aeruginosa

漢遜德巴酵母Pseudomonas fluorescens

笠原考克娃酵母Pseudomonas chlororaphis

叢毛紅曲Pseudomonas mendocina

疣梗曲霉Pseudomonas lundensis

裂褶菌Pseudomonas oryzihabitans

多主葡萄殼菌Pseudomonas alcaligenes

壯觀鏈霉菌Streptomyces│spectabilis 質(zhì)量規(guī)格：檢查

鼠李糖短狀桿菌Brachybacterium│rhamnosum 質(zhì)量規(guī)格：含量測定

海桿菌Marinobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格：檢查
PPM1D抑制劑（CCT007093）ZNF423 英文名稱： 鋅指蛋白423抗體 0.2ml

DGAT1 英文名稱： 二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml

α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體 Anti-α-AF/α-Afa 0.1ml

Anti-XAF1/FITC 熒光素標記XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FAK(Tyr861) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated Anti-gen-4) 淋巴細胞相關(guān)抗原4/細胞毒性T細胞抗原-4抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg