商品介紹:
Ramipril是ACE抑制劑,IC50為5nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):87333-19-5 分子量:416.51 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:ACE抑制劑(Ramipril)
英文名稱:Ramipril
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
莪術(shù)二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Graphite powderFBXO28蛋白抗體包裝5g
莪術(shù)呋喃二烯英文名稱: Hexylene glycolFBXW5蛋白抗體包裝1g
莪術(shù)烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: HMPA, hexamethylphosphoramideFBXW12蛋白抗體包裝5g
鵝不食草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydrindantin hydrateFBXO42蛋白抗體包裝1g
厄弗酚英文名稱: Hydroxypropyl celluloseFasL抗體包裝250mg
餓螞蝗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indoxyl-Gal原纖維蛋白1抗體包裝5g
蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indoxyl-Glucuronide胰腺衍生因子抗體包裝1g
兒茶(兒茶)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iodobenzene性成纖維生長因子抗體包裝5g
兒茶沒食子酯英文名稱: Iron (II) sulfide8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝1g
二基庚烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron (II,III ) oxide8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝1g
二羥茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron (III) oxideFas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白包裝5g
二氫丹參I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ron powder reduced胰腺衍生因子抗體包裝100ml
二氫辣椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isophorone補(bǔ)體因子H抗體包裝25ml
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Isovanillin磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體包裝1g
二氫歐山芹當(dāng)歸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IsovanillinFas相關(guān)1因子抗體包裝5g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR上皮特異性抗原試劑盒去芹菜糖桔梗皂苷D;Deapio-pla
: DSM44492資源名稱: 擬諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%傷寒抗體試劑盒千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷
青霉屬菌Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%傷寒試劑盒千金子二萜二乙酰酰酯;5,15-D
ACE抑制劑(Ramipril)血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷Human, Mouse
信號(hào)通路Wnt1抗原6,7,4'-三羥異黃Human
包含氧化還原的WW域抗原6-氧二氫血根Human, Rat
X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗原6-氧山柰酚-3-O-蕓香糖苷Human, Mouse
XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗原6-姜酚(姜辣)Human, Mouse
X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白/切除修復(fù)因抗原6-姜烯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗原6-羥(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
ARC(多肽抗原)6-異麥冬黃烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
血管緊張Ⅱ受體(抗原)7,4'-二羥黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat