平滑肌細(xì)胞遷移和增殖抑制劑(TAS-301)

平滑肌細(xì)胞遷移和增殖抑制劑(TAS-301)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-p90RSK/FITC 熒光素標(biāo)記絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-SRC3/KAT13B/AIB1/FITC 熒光素標(biāo)記類(lèi)固醇受體輔助活化因子-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus ant

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
L-甘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Voriconazole周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝50mg

L-谷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Vorinostat/SAHA膽固25羥化抗體包裝1g

L-谷酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Vorinostat/SAHA天冬-胱特異性蛋白家族抗體包裝5g

L-胱（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Argireline Acetate鈣營(yíng)養(yǎng)蛋白1/鈣結(jié)合蛋白8抗體包裝1g

L-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Levothyroxine鈣結(jié)合蛋白5/3抗體包裝250mg

L-硫(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： AdenineCD98輕鏈抗體包裝1g

L-狀腺(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Adenine胰輔脂抗體包裝5g

L-狀腺鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Erythromycin ethylsuccinate17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框104抗體包裝100MG

L-精(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Ibuprofen和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄蛋白抗體包裝1g

L-賴（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱(chēng)： Ibuprofen富半胱肝結(jié)合蛋白61抗體包裝250MG

L-酪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Enalapril Maleate2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框65抗體包裝1g

L-亮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Enalapril Maleateβ連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體包裝5g

L-羥基脯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 5-Fluorouracil陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控樣蛋白1抗體包裝1g

L-乳(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： 5-FluorouracilDNA斷裂因子相似蛋白A抗體包裝5g

L-色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng)： Sumatriptan succinate DNA斷裂因子相似蛋白B抗體包裝1g

: =NBRC105666資源名稱(chēng): 西北奇異球菌 質(zhì)量規(guī)格：>95%血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白試劑盒血竭高鹽;Dracohodin p

: ivcas7.00975資源名稱(chēng): 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>99%血清/糖皮質(zhì)激調(diào)節(jié)激2試劑盒9-硝基喜樹(shù)堿;9-Nitrocampt

鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血漿抗凝蛋白S試劑盒新補(bǔ)骨脂異黃;Neobavaisofl
平滑肌細(xì)胞遷移和增殖抑制劑(TAS-301)纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體短葶山麥冬皂苷C（標(biāo)準(zhǔn)品） Cinepazide maleate

纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白80抗體短葉松(標(biāo)準(zhǔn)品) Cinepazide maleate

CD101抗體斷血流皂苷A（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium sulfadiazine(SD-Na)

免疫球蛋白超家族成員5抗體對(duì)氧 Sodium sulfadiazine(SD-Na)

alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體對(duì)羥(標(biāo)準(zhǔn)品) 4,4-Diethoxybutylamine

胰島抗體對(duì)香豆;對(duì)羥肉桂(標(biāo)準(zhǔn)品) 4-Isopropoxyethoxymethylphenol

對(duì)葉百部（標(biāo)準(zhǔn)品） AVL-292

中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體對(duì)葉百部三鹽 5-Methylnicotinic acid

CD339抗體盾葉薯蕷（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-Fluoroindole-2-carboxylic acid