乙型肝炎病毒染色液(Tanaka維多利亞藍(lán)法)

乙型肝炎病毒染色液(Tanaka維多利亞藍(lán)法)公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-Syndecan 4/FITC 熒光標(biāo)記抗化多配體聚糖4抗體IgG百里香酚酞 AR
KGFR/FGFR2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記角質(zhì)形成生長(zhǎng)因子受體/成纖維生長(zhǎng)因子受體2抗體IgG百里香酚酞 indicator
KiSS-1R/GPR54/GPCR54/FITC 熒光標(biāo)記G蛋白偶聯(lián)受體54抗體IgG百里香酚

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

1,4,7-三基哌啶-1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二...英文名稱(chēng)： Coronene一種腫瘤抑制基因抗體（N端）包裝5g

1-(6-Chloro-9H-咔唑-2-yl)乙?；?...英文名稱(chēng)： Coronene (purified by sublimation)腺苷單磷活化蛋白激α1/AMPK α 1抗體包裝1g

1-β-D-呋核亞硝尿-1,2,4-三唑-3-羧酯英文名稱(chēng)： Corannulene維生K依賴(lài)的蛋白C重鏈抗體包裝5g

1-含氧的布洛芬英文名稱(chēng)： 2,5-Diphenyl-1,3,4-oxadiazole神經(jīng)叢蛋白A1抗體包裝1g

1-基-煙?；镉⑽拿Q(chēng)： 2,5-Di(1-naphthyl)-1,3,4-oxadiazolep21激活激4抗體包裝25g

1-基英文名稱(chēng)： 9,10-Di(1-naphthyl)anthracene磷化p21激活激4/5/6抗體包裝5g

1-基吲唑-3-羧（格拉司瓊雜質(zhì)D）英文名稱(chēng)： 2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene磷化p21激活激1/2抗體包裝100ml

1-萘乙酰精三鹽英文名稱(chēng)： Perylene磷化p21激活激1/2抗體包裝25ml

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對(duì)映異構(gòu)體混合物)英文名稱(chēng)： Perylene (purified by sublimation)磷化p21激活激2抗體包裝5ml

1-去 2-基格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)A）英文名稱(chēng)： 1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene磷酯Cγ2抗體包裝10g

1-去 格拉司瓊（格拉司瓊雜質(zhì)B）英文名稱(chēng)： Triphenylene磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝50g

1-月桂酰-3-英文名稱(chēng)： meso-Tetraphenylchlorin磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-α抗體包裝100g

10-反式-阿托伐他?。ò⑼蟹ニ‰s質(zhì)AT10）((3...英文名稱(chēng)： Tetraphenylporphyrin (Chlorin free)P73腫瘤抑制基因抗體包裝25g

10-反式-阿托伐他汀縮合物叔丁基酯英文名稱(chēng)： 2,4,6-Triphenyl-1,3,5-triazine表觀抑制因子Polycomb家族成員PCGFl蛋白抗體包裝25g

10-羥基華法林(非對(duì)映異構(gòu)體混合物)英文名稱(chēng)： 1,3-Diphenyl-1,3-propanedioneG蛋白偶聯(lián)嘌呤受體p2y10抗體包裝5g

泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品過(guò)氧化試劑盒低聚果糖-蔗果五糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

桔灰青霉Penicillium│aurantiogriseum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRS轉(zhuǎn)移TT試劑盒低聚果糖-蔗果四糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證

副豬嗜血桿菌Haemophilus│parasuis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒低聚果糖-蔗果三糖;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證
乙型肝炎病毒染色液(Tanaka維多利亞藍(lán)法)亞銹褐褶 6-溴-2,3-二氮雜萘酮活躍腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa

大腸埃希 5-甲氧基-2-甲基-3-乙酸甲酯α1微球蛋白Elisa

球孢白僵 1-Boc-母親DPP同源物4Elisa

Taibaiella 2,2-二甲基-1-視網(wǎng)膜母瘤蛋白1Elisa

達(dá)班湖喜鹽芽孢桿 1-甲基-3-甲脫腳病病Elisa

紅球 2--4-基嘧啶單核趨化蛋白2Elisa

米根霉 2,3,5-三溴吡啶白三烯E4Elisa

葉點(diǎn)霉屬 2-溴-3--5-(三氟甲基)吡啶Wnt-16蛋白Elisa

塔賓曲霉 5-溴-3--7-氮雜神經(jīng)酪氨酸激受體1Elisa

矮小青霉 3-氟-5-吡啶神經(jīng)酪氨酸激受體2Elisa

發(fā)酵畢赤酵母 8--5-氨基喹啉腫瘤壞死因子受體超家族成員1BElisa

香菇 3-氨基異煙酸膠原吡啶交聯(lián)Elisa

枯草芽孢桿 十二烷基二苯二磺酸鈉TAU-1蛋白Elisa

芽胞桿 來(lái)氟洛米TAU-5蛋白Elisa

皺紋假單胞 (2-甲氧基-5-)乙酸白血病病抗體Elisa