商品介紹:
BET bromodomain inhibitor是有效地BET抑制劑,來自WO/2015/153871A2,化合物實例11。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1505453-59-7 純度:99.51% 分子量:445.9 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
小鼠脂素1(LPIN1)ELISA試劑盒 ,英文名: LPIN1 ELISA Kit
犬2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA檢測試劑盒Canine2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 96T/48T
犬固酮(ALD)免疫試劑盒 Canine aldosterone,ALD ELISA Kit
英文名稱HumanInhibinAELISAKit人抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T
純化RNA樣品儲存液50毫升
RatHexokinase,HKELISA試劑盒大鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素12A(IL12A)ELISA試劑盒 ,英文名: IL12A ELISA Kit
人C型鈉尿肽(CNP)ELISA檢測試劑盒HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit 96T/48T
大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)免疫試劑盒 Rat Ciliary Neuroophic Factor,CF ELISA Kit
英文名稱Ratα1-AcidglycoproteinELISAKit大鼠α1-酸性糖蛋白(α1-AGP)規(guī)格:96T/48T
咖啡三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitSM人鞘磷脂規(guī)格:48T/96T
豬巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Collagen II (HCB II) ELISA Kit 人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒
PorcineEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforALT/GPT(HumanAlanineAminoansferase)ELISAKit人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶規(guī)格:48T/96T
血液活化凝血因子10(FACTORXa)活性熒光定量檢測試劑盒20次
PlaVitaminB12,VB12ELISAKit植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
BET抑制劑(BET bromodomain inhibitor)SIAH2 英文名稱: 泛素連接酶Siah2 0.1ml
FGFBP2 英文名稱: 纖維細(xì)胞生長因子結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
線粒體融合蛋白1抗體 Anti-Mfn1 0.1ml
Anti-Runx3/FITC 熒光素標(biāo)記新型抑癌基因/一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PI3K p85(Tyr458)/p55(Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg