化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：吖啶橙染色液
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹：
橙(Acridine Orange，AO)為一種熒光染料，該染料具有膜通透性，能透過細胞膜，使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長為488nm，吸收波長為515nm。它與細胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，復合物可發(fā)出不同顏色的熒光，紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此，在熒光顯微鏡下觀察，橙可透過正常細胞膜，使細胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細胞、凋亡細胞及壞死細胞。 儲存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。 有效期：一年。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調(diào)控；
⑤細胞分化及其調(diào)控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
番瀉葉（標準品）英文名稱： Lead (IV) acetateF-box蛋白家族FBXO18抗體包裝25g
翻白草（標準品）英文名稱： Lead powderFRG2B蛋白抗體包裝5g
反式茴香腦英文名稱： Lead(II) carbonate basicFAM71A蛋白抗體包裝25g
返魂草（麻葉千里光）（標準品）英文名稱： Leishman's stainFAM83F蛋白抗體包裝5g
芳樟(標準品)英文名稱： Leptomycin B 1% solutonFBXL17蛋白抗體包裝1g
防風（標準品）英文名稱： Lithium 3,5-diiodosalicylateFCHSD1蛋白抗體包裝1g
防己諾林堿（標準品）英文名稱： Lithium bromideFBXL5蛋白抗體包裝5g
防已（標準品）英文名稱： Lithium metaphosphateFBXL12蛋白抗體包裝1g
飛龍掌血根皮（標準品）英文名稱： Lithium oxalateFBXL3蛋白抗體包裝25g
飛揚草（標準品）英文名稱： Lithium stearateF-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體包裝5g
非洲防己堿(標準品)英文名稱： Lithium sulfate monohydrateFGFR1癌基因伴侶蛋白2抗體包裝100g
榧子（標準品）英文名稱： L-Threonic acid calcium salt成纖維生長因子受體底物2抗體包裝25g
粉萆薢（標準品）英文名稱： L-Tyrosine disodium salt hydrateFNBP1L蛋白抗體包裝5g
粉防己堿;漢防己(標準品)英文名稱： Luminol, sodium saltGATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體包裝100g
楓香脂（標準品）英文名稱： Magenta-GalCD349抗體包裝25g
檸檬明串珠菌Leuconostoc│citreum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品沙眼衣原體抗體試劑盒去氫駱駝蓬堿;Harmine?
季氏畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR沙眼衣原體抗體試劑盒L-羥脯 ;L-Hydroxypro
鏈格孢霉屬Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含量測定，標準品沙漠猬因子試劑盒青蒿琥酯 ;Artesunate
吖啶橙染色液馬來西亞鏈霉 RITA (NSC 652287)Smad同源物8Elisa
糙皮側(cè)耳 WHI-P154Gremlin-1蛋白Elisa
華盛頓腥擲孢 Dalcetrapib水痘-帶狀皰疹病抗體Elisa
釀酒酵母 Entinostat (MS-275)腮腺炎病IgG抗體Elisa
皺褶青霉 ZM 336372乙?？贵wElisa
硬結(jié)節(jié)桿 DAPT嘌呤霉敏感性氨肽Elisa
杜搟氏屬 Darunavir信號轉(zhuǎn)導分子1Elisa
枯草芽孢桿 Safinamide Mesylate信號轉(zhuǎn)導分子5Elisa
酒色紅菇 Deferasirox信號轉(zhuǎn)導分子8Elisa
淡紫擬青霉 Balaglitazone抗Ri抗體Elisa
變異鹽單胞 Atazanavir磷脂?？贵wElisa
尖孢鐮孢 PQ 401線粒體肽蛋氨酸亞砜還原Elisa
黑木耳 LomeguatribL-谷氨酸Elisa
禾生殼二胞 Lenalidomide羥甲基戊二酸單酰Elisa
葡枝根霉 Pomalidomide胱天蛋白3Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
化工儀器網(wǎng)