MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)

MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)公司正在出售的產(chǎn)品：EPOR/FITC 熒光標(biāo)記紅生成受體抗體IgG間溴苯 98%
ER/FITC 熒光標(biāo)記雌激受體抗體IgG溴烷 99%
ERAB/FITC 熒光標(biāo)記內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體IgG正丁烷 CP,98%
ERCC1/FITC 熒光標(biāo)記抗切除修復(fù)交叉互補(bǔ)因1抗體IgG對(duì)溴苯 99%
ERK1/ERK /FITC 熒光標(biāo)記絲裂

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

鼠傷寒沙門(mén)氏菌小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(lèi)Anti-NHLH1 Antibody人同型半胱(Hcy)

釀酒酵母小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白Anti-NKTR Antibody人同型半胱(Hcy)

矮棒曲霉人白介27Anti-NID1 Antibody人游離脂肪(FFA)

發(fā)酵畢赤酵母大鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體Anti-NKX2-1 Antibody人游離脂肪(FFA)

釀酒酵母人白介28Anti-NIFK Antibody人骨粘連蛋白(ON)

棘孢曲霉人白介29Anti-NKX2-6 Antibody人骨粘連蛋白(ON)

墨西哥畢赤酵母大鼠凋亡誘導(dǎo)因子Anti-NKX2-4 Antibody人葉(FA)

枯草芽孢桿菌人白介23Anti-NKX2-6 Antibody人葉(FA)

暗黑鏈霉菌小鼠CD30分子Anti-NKx2.2 Antibody 人內(nèi)(ET)

雙孢蘑菇小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)Anti-NKX3-1 Antibody人內(nèi)(ET)

光滑青霉人巨噬移動(dòng)抑制因子Anti-NKX2-8 Antibody人過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)

居巖牙殖球菌大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體Anti-NKX6-3 Antibody人過(guò)氧化物體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)

環(huán)柄菇人組織因子途徑抑制物Anti-NLRX1 Antibody人環(huán)孢A(CsA)

擬青霉小鼠可溶性血管內(nèi)皮蛋白C受體Anti-NKX6-3 Antibody人環(huán)孢A(CsA)

彩色豆馬勃大鼠堿性磷Anti-NLE1 Antibody人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

釀酒酵母人干擾誘導(dǎo)蛋白10Anti-NMBR Antibody人神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體火木層孔菌人肝癌細(xì)胞（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

腎結(jié)合蛋白抗體淺黃褐栓菌人間皮瘤細(xì)胞

環(huán)指蛋白211抗體#放射形土壤桿菌人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞Daoy（干細(xì)胞庫(kù)保藏）

RET指蛋白樣2/3抗體#需土節(jié)桿菌人小細(xì)胞肺癌
MDM2-p53相互作用抑制劑(MI-773)鯉鏈霉 對(duì)羥基丁酯

日本根霉 月桂酸甲酯

枯草芽孢桿 對(duì)羥基甲酯

嗜酸乳桿 單硬脂酸甘油酯

米根霉 萘AS-BI磷酸二鈉

卵形巴貝斯蟲(chóng)（文縣株） 萘AS-TR磷酸鹽

毛木耳 萘AS-TR乙酸酯

食苯芽胞桿 4-N,N-二甲基氨基偶氮苯-4`-異硫酸酯

蘇云金芽孢桿 焦碳酸二乙酯

纖細(xì)白僵 二十七烷

粘質(zhì)沙雷氏 三苯烷

猴頭 二安替比林

耐鹽咸海鮮球 1,1,3,3-四乙氧基烷

塔賓曲霉 2，2-二(4-羥基苯)烷

釀酒酵母 角鯊?fù)?/span>